Intramuskuläre (IM) Injektion: Verabreichung von Verbindungen in den Rückenmuskel eines erwachsenen Zebrafisches

- Übertragen Sie einen mit Tricain betäubten Fisch mit der Rückenseite nach oben auf einen nassen Schwamm. Legen Sie den Schwamm mit dem Fisch unter ein Mikroskop. Positionieren Sie eine Mikroinjektionsnadel in einem Winkel von 45 Grad zur Körperachse in der Nähe des Rückenmuskels.

Suchen Sie als Nächstes die Stelle vor der Rückenflosse, die nicht mit Schuppen bedeckt ist, an der Sie die Nadel ohne großen Kraftaufwand einführen können. Führen Sie dann die Nadel vorsichtig ein und injizieren Sie langsam die interessierende Verbindung zusammen mit einem Marker wie Phenolrot in den Muskel.

Wenn die interessierende Verbindung genetisches Material enthält, elektropolieren Sie die Zellen, indem Sie Elektroden auf beiden Seiten der Injektionsstelle platzieren und den Strom verabreichen. Die Strömung macht die Muskelzellen durchlässig und in der Lage, das Erbgut effizient aufzunehmen. Setzen Sie den Fisch nach dem Eingriff sofort in ein Auffangbecken um. Im folgenden Protokoll werden wir eine intramuskuläre Injektion an einen erwachsenen Zebrafisch durchführen, um einen DNA-Impfstoff gegen Mykobakteriose zu verabreichen.

Um den Fisch während der Injektion in einer festen Position zu halten