Mikroinjektion von Embryonen: Eine Technik, um eine Verbindung in das Eigelb des Zebrafisches zu bringen

0 Aufrufe • 3:58 Min. • April 30th, 2023

- Setzen Sie zwei weibliche und zwei männliche Fische eine Nacht vor der Injektion in ein geteiltes Zuchtbecken. Entfernen Sie am nächsten Morgen die Trennwand und lassen Sie die Fische brüten, bis Sie Eier am Boden des Tanks beobachten. Sammeln Sie die Eier und waschen Sie sie mit E3-Medium, das Methylenblau, ein Fungizid, enthält. Betrachten Sie die Eier unter dem Mikroskop und entfernen Sie unbefruchtete Eier. Unbefruchtete Eier haben eine klare Dottermembran, während befruchtete Eier eine dunkle Dottermembran haben.

Bewahren Sie 10 Embryonen in einer separaten Petrischale als nicht injizierte Kontrollen auf. Richten Sie die Embryonen mit einer Transferpipette bei Raumtemperatur in den Trog einer Mikroinjektionsplatte aus und legen Sie sie unter das Mikroskop. Schieben Sie die Mikroinjektionsnadel vorsichtig durch das Chorion in das Eigelb und injizieren Sie langsam eine interessante Verbindung, die einen Marker wie Phenolrot enthält. Der zytoplasmatische Fluss ermöglicht es der Verbindung, in die embryonalen Zellen zu diffundieren.

Nach der Injektion züchten Sie die Embryonen in E3-Medium mit Methylenblau bei 28 Grad Celsius. Überprüfen Sie immer wieder die Gesundheit der Embry

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