Darmdissektion bei adulten Zebrafischen: Eine Technik zur Analyse der Absorption von Verbindungen

0 Ansichten2:13 Min. • April 30th, 2023

- Legen Sie einen eingeschläferten Fisch auf Filterpapier und tupfen Sie ihn trocken. Bewahren Sie den Fisch auf einer Präpariermatte auf. Stecke die Augenhöhle am vorderen Ende und den Schwanz am hinteren Ende fest. Schneiden Sie die Haut und den darunter liegenden Muskel entlang des Bauches von der Analflosse bis zum Operculum, der harten Hülle über den Kiemen.

Entfernen Sie das Operculum und die Brustflosse. Schneiden Sie die Haut und den darunter liegenden Muskel von den Kiemen nach hinten an der Seite des Fisches bis zur oberen Afterflosse ab. Öffne nun den Schnitt mit Hilfe einer feinen Pinzette. Entfernen Sie den Magen-Darm-Trakt aus dem Körper und legen Sie ihn auf das Filterpapier.

Trennen Sie den Darm von anderen inneren Organen. Der Darm ist in drei Abschnitte gefaltet, den rostralen Darmknollen, den Mitteldarm und den Schwanzdarm. Halten Sie den vorderen und hinteren Teil des Darms mit der Pinzette fest und dehnen Sie ihn vorsichtig aus. Rollen Sie den Darm auf das Filterpapier, um alle anhaftenden Tücher zu entfernen. Im folgenden Protokoll werden wir den Darm eines erwachsenen Zebrafisches isolieren, um die Aufnahme von Immunstimulanzien zu analysieren.

- Nachdem Sie den Fisch gemäß dem Textprotokoll eingeschläfert haben, legen Sie den Fisch auf ein Stück Filterpapier. Machen Sie mit einer scharfen Präparierschere einen halbkreisförmigen Schnitt vom Anus bis zum Operculum und öffnen Sie den Schnitt mit einer feinen Pinzette. Schneiden Sie dann beide Enden des Darms ab, nehmen Sie alle inneren Organe heraus und legen Sie sie auf das Filterpapier. Trennen Sie dann den Darm von den inneren Organen und dehnen Sie ihn, wobei Sie darauf achten, dass der gesamte Darm erhalten bleibt. Zum Schluss rollst du den Darm mit einer Pinzette auf das Filterpapier, um das Klebegewebe zu lösen.