Co-Kultivierung von BC-Zellen: Kultivierung von Brustkrebszellen mit Knochenfragmenten zur Untersuchung der Proliferation von Krebszellen

Beginnen Sie damit, ein Stück Knochenwachs in zwei Zellkulturplatten zu geben, die als Test und Kontrolle gekennzeichnet sind. Pipettieren Sie eine angemessene Menge an Biolumineszenz-exprimierenden Brustkrebszellen in jeder Plattenmitte und inkubieren Sie die Platten für eine bestimmte Dauer, um die Zelladhäsion zu unterstützen. Legen Sie ein kleines Knochenexplantat auf das Knochenwachs in der Testplatte und fixieren Sie es durch Druck.

Gießen Sie langsam ein Zellkulturmedium mit fötalem Rinderserum, einem Wachstumszusatz, auf jede Plattenseite, um das Explantat einzutauchen und für eine bestimmte Dauer bei 37 Grad Celsius zu inkubieren. Das Knochengewebe in der Testplatte setzt lösliche Faktoren wie Zytokine und SRC-Kinase frei, die Brustkrebszellen anziehen und zu deren Wanderung führen. Fügen Sie jeder Platte ein Substrat hinzu und platzieren Sie die Platten auf einer Biolumineszenz-Bildgebungskammer.

Das biolumineszierende Protein der Krebszelle oxidiert das Substrat und emittiert Licht. Quantifizieren Sie die Proliferation, indem Sie die Gesamtzahl der von jeder Zelle emittierten Photonen mit der Software messen. Krebszellen in der Testplatte sollten sich schneller vermehren