Dezellularisierung von Brustfettpolstern: Ableitung von extrazellulären Matrix-Hydrogelen aus Brustfettpolstern
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Krebsforschung
0 Aufrufe • 6:41 Min. • April 30th, 2023
Legen Sie zunächst Brustfettpolster oder MFPs in eine Schale mit Trypsin-EDTA-Lösung und inkubieren Sie für die gewünschte Dauer, um die Zellmatrix-Adhäsionen aufzubrechen. Waschen Sie die MFPs mit entionisiertem Wasser und seihen Sie sie durch ein Sieb. Geben Sie die Taschentücher in ein Becherglas mit einem Rührstab und fügen Sie Triton X-100 hinzu. Rühren Sie um, um die Zellen zu lysieren, ohne die Wachstumsfaktoren in der extrazellulären Matrix des Gewebes zu beeinflussen.
Die MFPs abseihen und mit entionisiertem Wasser abspülen. Übertragen Sie das Gewebe zurück in das Becherglas und fügen Sie Desoxycholsäure hinzu, um die verbleibenden Zellen zu lysieren. Als nächstes die MFPs abseihen und in ein Becherglas geben, das entionisiertes Wasser mit Penicillin-Streptomycin enthält, um eine Kontamination zu verhindern. Inkubieren Sie den Becher über Nacht bei 4 Grad Celsius.
Die MFPs abseihen und in ein Becherglas geben, das Ethanol und Peressigsäure enthält. Die Peressigsäure erhöht die Steifigkeit der extrazellulären Matrix des Gewebes. Rühren Sie einige Zeit um und wiederholen Sie den Siebschritt. Waschen Sie die MFPs mit PBS und dann mit entionisiertem Wasser. Übertragen Sie die
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