JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:36 Min. • April 30th, 2023
- Injizieren Sie zunächst Bleomycin, ein nicht-ribosomales Hybridmedikament, intratracheal bei Mäusen einige Tage vor der Transplantation von Krebszellen, um eine Fibrose in der Lunge zu induzieren. Als nächstes züchten Sie Lungenkrebszelllinien in einem Gewebekulturmedium. Bereiten Sie die Suspension von Krebszellen vor, indem Sie Zellen in PBS verdünnen. Injizieren Sie Ketamin-Xylazin-Lösung intraperitoneal, um die vorkonditionierte Maus zu betäuben.
Platzieren Sie nun die Maus auf einer Intubationsplattform, indem Sie ihre Vorderzähne mit dem Rücken gegen die Plattform hängen. Öffne den Mund und ziehe die Zunge vorsichtig heraus. Positionieren Sie einen Katheter in der Luftröhre, bis die Oberseite die Vorderzähne erreicht, und geben Sie die gewünschte Menge an Krebszellsuspension in die Luftröhre ab, um biolumineszierende Krebszellen in der Lunge zu transplantieren.
Warten Sie, bis die Maus die gesamte Lautstärke einatmet. Entfernen Sie vorsichtig den Katheter und legen Sie die Maus auf ein Wiederherstellungspad. Nach einigen Tagen injizieren Sie Luciferin retroorbital in abwechselnde Augen und platzieren Sie die Maus auf einem Imager.
Krebszellen produzieren Luciferase, die Luc
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