3D-Co-Kultur von Lungenkrebszellen mit CAFs: Ein In-vitro-Modellsystem zur Untersuchung der Tumorprogression

- In 3D-Co-Kulturen werden mehrere Zelltypen in Matrizen wie einer Basalmembranmatrix zusammengezüchtet, die die natürliche Mikroumgebung der extrazellulären Matrix nachahmt und so Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen erleichtert. Um eine eingebettete 3D-Co-Kultur zu etablieren, bereiten Sie eine einheitliche Suspension von krebsassoziierten Fibroblasten oder CAFs und Lungenkrebszellen her, die in zwei zu zwei Verhältnissen in der Basalmembranmatrix entnommen werden. Halten Sie die Suspension auf Eis, um eine Verfestigung der Matrix bei Umgebungstemperaturen zu verhindern.

Übertragen Sie ein geeignetes Volumen der Suspension in eine Zellkulturplatte. Inkubieren Sie bei 37 Grad Celsius für die erforderliche Dauer, um die Zellen gemeinsam in die Matrix einzubetten. Um eine überlagerte 3D-Co-Kultur zu etablieren, bereiten Sie eine Suspension von Lungenkrebszellen in einer Basalmembranmatrix in der gewünschten Zelldichte vor. Halten Sie die Aufhängung auf Eis. Pipettieren Sie ein geeignetes Volumen dieser Zellmatrix-Suspension in eine Zellkulturplatte. Inkubieren Sie bei 37 Grad Celsius, um die eingebettete Krebszell-Monokultur einzurichten.

Anschließend wird das gewünschte Volumen