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Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:17 Min. • April 30th, 2023
- Tyrosinkinase-Inhibitoren, TKI, blockieren die Bindung des Kinaserezeptors an ATP und verhindern so die Phosphorylierung. Beginnen Sie mit dem Plattieren von Krebszellen in Wachstumsmedien. Lassen Sie sie eine günstige Dichte erreichen und übertragen Sie die Zellen in mehrere Vertiefungen. Geben Sie nach dem Wachstum über Nacht unterschiedliche Wirkstoffkonzentrationen in mehreren Vertiefungen ab und lassen Sie die Zellen für die gewünschte Dauer wachsen. Fügen Sie MTT, einen wasserlöslichen Farbstoff, hinzu, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu messen. Mitochondriale Enzyme wandeln MTT in lebenden Zellen in unlösliches violettes Formazan um.
Stoppen Sie die Reaktion durch Zugabe eines geeigneten Lösungsmittels und messen Sie Formazan spektrophotometrisch. Diese Methode wird als MTT-Assay bezeichnet. Zeichnen Sie ein Diagramm der lebenden Zellen, angezeigt durch Formazan, im Vergleich zu den Arzneimittelkonzentrationen. Berechnen Sie die Hemmkonzentration, IC50, indem Sie mit der Software die Wirkstoffkonzentration ermitteln, die 50 % der Zellen abtötet.
Als nächstes züchten Sie Krebszellen im Wachstumsmedium und verteilen sie auf drei verschiedene Platten. Nachdem die Zellen die
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