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Krebsforschung
0 Aufrufe • 3:56 Min. • April 30th, 2023
- Legen Sie zuerst die Eier in eine Petriplatte und fügen Sie Danieau's Lösung hinzu, um die frisch gesammelten Eier zu erhalten. Fügen Sie Phenylthioharnstoff hinzu, um die Pigmentierung zu hemmen, und inkubieren Sie einige Tage lang. Nach der Inkubation dechorionieren Sie die Embryonen mit einer scharfen Pinzette und lassen Sie sie weiter wachsen.
Als nächstes säen Sie die gewünschte Anzahl von Krebszellen in einen Kulturkolben und inkubieren über Nacht. Fügen Sie nun krebshemmende Wirkstoffe hinzu und inkubieren Sie weiter. Fügen Sie nach der Inkubation einen fluoreszierenden Zelltracker-Farbstoff hinzu, der an die Zellmembran bindet und die Zellen färbt.
Fügen Sie als nächstes Trypsin für die Zelldissoziation hinzu und verdünnen Sie die Zellen vor dem Eingriff in der phenolroten PBS-Lösung, um den pH-Wert zu bestimmen. Bestücken Sie betäubte Zebrafischembryonen auf einer Agarplatte. Laden Sie nun die Mikrokapillare mit Krebszellsuspension und injizieren Sie sie in den Dottersack der Embryonen.
Die Embryonen werden auf Kulturplatten mit Danieau-Lösung übertragen und weiter inkubiert. Übertragen Sie als Nächstes einige Embryonen auf einen Objektträger und fügen Sie Methylcellulos
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