miRNA-Extraktion: Eine Methode zur Extraktion von miRNA aus Plasmaproben

- MicroRNAs oder miRNAs sind kleine nicht-kodierende RNAs, die an der Genregulation beteiligt sind. Ihre Expression wird während einer Krebserkrankung verändert und ist daher ein potenzieller Biomarker für Krebs. Um mit der miRNA-Isolierung zu beginnen, nehmen Sie eine frisch entnommene Vollblutprobe und zentrifugieren Sie sie bei 4 Grad Celsius, um das Plasma von den Blutzellen zu trennen. Den Überstand in ein frisches Röhrchen umfüllen und erneut zentrifugieren, um einen klareren Plasmaüberstand zu erhalten. Der Überstand wird extrahiert, mit gekühlter Homogenisierungslösung behandelt, gefolgt von einem Lysepuffer zur Homogenisierung der Probe. Fügen Sie Proteinase-K-Enzymlösung hinzu, um Proteine abzubauen, insbesondere die Nukleasen, die sonst RNA in nachgelagerten Schritten verdauen würden.

- Laden Sie anschließend das Lysat in die dafür vorgesehene Vertiefung einer vormontierten instrumentenspezifischen Nukleinsäure-Extraktionspatrone. Geben Sie DNase 1-Lösung in die entsprechende Vertiefung, um genomische DNA aus der Probe zu entfernen. Geben Sie nukleasefreies Wasser in das auf der Kartusche montierte Elutionsröhrchen, um es vor der miRNA-Isolierung zu konditionieren. Legen