G-10-säulenbasierte Sortierung von Leukämiezellen: Eine Methode zur Aufreinigung von akuten lymphatischen Leukämiezellen aus Stromazellen des Knochenmarks

- Fügen Sie zunächst Trypsin zu einer Platte hinzu, die Leukämiezellen enthält, die zur Zelldissoziation mit Knochenmarkstromazellen kokultiviert wurden. Zentrifugieren Sie das Pellet und suspendieren Sie es mit vorgewärmten Medien, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten. Die G-10-Säule enthält vernetzte Dextrankügelchen, die in Wasser aufquellen und eine Gelmatrix bilden.

Äquilibrieren Sie die G-10-Säule mit vorgewärmten Medien, um den Raum zwischen den Perlen zu füllen und ein langsames Austreten des Mediums aus der Säule zu gewährleisten. Halten Sie eine geeignete Temperatur in der Säule aufrecht, um die Bildung von Luftblasen zu verhindern. Laden Sie die Zellmischung langsam auf die Gelkügelchen in der G-10-Säule. Inkubieren Sie die Zellen auf der G-10-Säule bei Raumtemperatur für die gewünschte Dauer. Basierend auf den Eigenschaften und der Größe der Zelloberfläche schränken die Gelkügelchen bevorzugt die größeren Stromazellen des Knochenmarks ein und ermöglichen so die Trennung der Leukämiezellen.

Geben Sie vorgewärmtes Medium in die Säule und sammeln Sie die Suspension der Leukämiezellen. Zentrifugieren Sie die Zellsuspension und resuspendieren Sie das Pellet in einem