T-Zell-Anreicherung: Eine Technik zur Isolierung von T-Zellen aus gemischten Zellpopulationen durch magnetische Trennung

- T-Zellen, eine Klasse von Lymphozyten, spielen eine aktive Rolle bei der Bekämpfung von Infektionen. Neben vielen anderen Blutzelltypen sind immunkompetente T-Zellen in der Milz und den Lymphknoten der Maus vorhanden. Um T-Zellen selektiv zu isolieren, werden Milz und Lymphknoten der Maus entnommen und auf einem Zellsieb mazeriert. Spülen Sie das Gewebe mit einem geeigneten Medium, um eine Einzelzellsuspension zu erhalten.

Fügen Sie Ammoniumchlorid-Kalium oder ACK-Puffer hinzu, um die roten Blutkörperchen zu lysieren. Zentrifuge, um die intakten Blutzellen vom Lysat zu trennen. Den Überstand verwerfen und die Zellen in einem geeigneten Puffer resuspendieren. Behandeln Sie die Suspension mit einer Mischung aus biotinylierten Antimaus-Antikörpern, die auf Blutzellen wie Granulozyten, B-Zellen, NK-Zellen und alle verbleibenden Erythrozyten abzielen. T-Zellen werden nicht angegriffen und bleiben daher unmarkiert.

Fügen Sie als Nächstes der Suspension magnetische Anti-Biotin-Mikrokügelchen hinzu. Alle Biotin-markierten Zellen binden an die Mikrokügelchen. Unter dem Einfluss eines starken Magnetfeldes haften die magnetisch markierten Zellen an der Röhrenwand. Unmarkierte T-Zellen bleib