Negative immunomagnetische Selektion: Eine Methode zur Aufreinigung von B-Zellen aus mononukleären Zellen des peripheren Blutes

Zu den mononukleären Zellen des peripheren Blutes oder PBMCs gehören B-Zellen, T-Zellen, natürliche Killer- oder NK-Zellen und Monozyten. B-Zellen produzieren Immunglobulinmoleküle, um Infektionen zu bekämpfen. Bei Leukämie vermehren sich diese Zellen und metastasieren in verschiedene Organe.

Um B-Zellen zu isolieren, beginnen Sie mit einer Suspension isolierter PBMCs. Fügen Sie eine primäre Antikörpermischung hinzu, die gegen bestimmte Zelloberflächenmoleküle gerichtet ist, die als Differenzierungscluster oder CD bezeichnet werden. Spezifische Antikörper binden an das CD-3-Molekül auf T-Zellen, das CD-14-Molekül auf Monozyten und das CD-16-Molekül auf NK-Zellen, wobei die B-Zellen unmarkiert bleiben.

Waschen Sie anschließend die Probe, um die ungebundenen Antikörper zu entfernen. Geben Sie der Probe sekundäre Antikörper-konjugierte magnetische Mikrokügelchen zu. Sekundäre Antikörper binden an die FC-Region von Primärantikörpern, die an bestimmte Zellen gebunden sind. Das Röhrchen mit der markierten Zellsuspension unter den Einfluss eines Magnetfeldes setzen. Im Feld wandern die magnetisch markierten Zellen und binden an die Röhrenwand, was zu einer negativen Selektion der unerwüns