Isolierung fluoreszenzmarkierter T-ALL-Zellen: Eine Methode zur Isolierung von T-ALL-Zellen aus adulten Zebrafischen

- Akute lymphatische T-Zell-Leukämie (T-ALL) ist eine Krebsart, die auftritt, wenn Lymphozyten nicht reifen und als unreife Zellen, sogenannte Lymphoblasten, verbleiben. Diese abnormalen Zellen sind bei der Bekämpfung von Infektionen unwirksam. Da sich diese unreifen Zellen schnell teilen, sind sie gesunden Blutzellen zahlenmäßig überlegen und können zu Organen wie Milz, Leber und ZNS gelangen.

Die Tumore im Zebrafisch ähneln denen, die beim Menschen gebildet werden. Daher ist der Zebrafisch das bevorzugte Modell zur Erzeugung von T-ALL-Tumorzellen.

Beginnen Sie mit der Auswahl der transformierten Fische, die Fluoreszenzsignale zeigen, die auf die Ausbreitung von Tumorzellen hinweisen. Entfernen Sie den eingeschläferten Fischkopf und waschen Sie die Körperhöhle mit Heparinlösung, um überschüssige rote Blutkörperchen zu entfernen. Injizieren Sie nun einen geeigneten Puffer in die Körperhöhle. Üben Sie sanften Druck von außen aus und sammeln Sie den Puffer mit den Tumorzellen in einem Mikrofugenröhrchen.

Färben Sie die Zellen mit Trypanblau und betrachten Sie sie unter dem Mikroskop. Lebende Tumorzellen erscheinen fluoreszierend und farblos, wenn sie mit Trypanblau gefärbt sind, da d