Induktion der Azinus-zu-duktalen Metaplasie: Eine Methode zur Untersuchung der Differenzierung von Azinuszellen zu duktalen Zellen in 3D-Ex-vivo-Kultur

0 Aufrufe • 3:21 Min. • April 30th, 2023

- Der exokrine Teil der Bauchspeicheldrüse besteht aus Azinuszellen und duktalen Zellen. Azinuszellen synthetisieren und sezernieren Verdauungsenzyme in ihr Lumen. Die duktalen Zellen kleiden die Röhre aus, die diese Enzyme an den Dünndarm liefert. Um sich an genetischen und umweltbedingten Stress anzupassen, werden Azinuszellen morphologisch und funktionell in gangartige Zellen umgewandelt, die als Azinus-zu-Duktal-Metaplasie (ADM) bezeichnet werden.

Manchmal kann ADM zum Ausbruch von Bauchspeicheldrüsenkrebs führen. Um ADM ex vivo zu induzieren, stellen Sie eine gekühlte Kollagenzellsuspension her, indem Sie primäre Azinuszellen mit Kollagengel kombinieren, das auf Eis aufbewahrt wird, um eine Verfestigung der Matrix zu verhindern. Behandeln Sie die Suspension mit einem ADM-Teststimulans oder -inhibitor von Interesse.

Verteilen Sie die Suspension in eine Kulturplatte und inkubieren Sie, um die Kollagenverfestigung zu erleichtern und die Zellen darin einzubetten. Als nächstes pipettieren Sie ein zusätzliches Volumen des Mediums, das das gewünschte Test-ADM-Stimulans oder den Inhibitor enthält, über die verfestigte Kollagenzellschicht.

Inkubieren Sie die Platte für eine angemessene

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