PDAC-Stammzellisolierung: Eine Methode zur Isolierung von Krebsstammzellen aus Bauchspeicheldrüsentumoren

- Stammzellen von Bauchspeicheldrüsenkrebs (CSCs) sind eine Untergruppe der selbsterneuernden Krebszellen und können den gesamten Tumor hervorbringen. CSCs befinden sich in einer gut geschützten Nische, die aus anderen Zellen wie Fibroblasten, Immunzellen, Endothelzellen und extrazellulären Matrixkomponenten wie Zytokinen und Wachstumsfaktoren besteht. Die Interaktionen, die zwischen den Zellen in einer solchen Umgebung stattfinden, helfen den CSCs, sich zu vermehren und das Tumorwachstum zu erhöhen.

Um die Eigenschaften von CSCs zu untersuchen, isolieren wir sie aus den Pankreastumoren. Beginnen Sie mit der Entnahme der Zellsuspension aus menschlichem Pankreastumorgewebe in einem CSC-Wachstumsmedium. Anschließend wird die Suspension, die hauptsächlich aus Fibroblasten und CSCs besteht, auf eine mit Gelatine beschichtete Platte ausgesät und für die gewünschte Dauer inkubiert. Fibroblasten haften an der Gelatineoberfläche und lassen die frei schwebenden CSCs in der Zellsuspension zurück.

Nehmen Sie eine kleine Menge Zellsuspension und fügen Sie Trypanblau hinzu. Pipettieren Sie diese Mischung in ein Hämozytometer und zählen Sie die Anzahl der lebensfähigen Zellen. Trypanblau dringt