CTC-Isolierung aus einer Vollblutprobe: Eine Methode zur Gewinnung von CTCs aus dem Modell des murinen Darmkrebses

- Zirkulierende Tumorzellen (CTCs) sind die Krebszellen, die aus dem Primärtumor stammen und in den Blutkreislauf gelangen. Die meisten CTCs können im Blutkreislauf überleben, ohne sich an der Oberfläche festzusetzen; Daher können wir sie bei den meisten Krebspatienten direkt aus dem Blut nachweisen.

CTCs im Blut können auf die Ausbreitung des Tumors im Körper hinweisen, daher hilft ihre Identifizierung, das Fortschreiten des Krebses zu verstehen. Beginnen Sie mit der Entnahme eines anästhesierten Darmkrebs-Mausmodells und gewinnen Sie Blut durch Herzpunktion. Übertragen Sie das Blut in ein konisches Röhrchen mit Dichtegradientenmedium und zentrifugieren Sie, um die Blutbestandteile zu trennen.

Entsorgen Sie die oberste Schicht mit Plasma und sammeln Sie die an der Grenzfläche vorhandene mononukleäre Blutzellfraktion (PBMC) in einem separaten Röhrchen. Fügen Sie als Nächstes den Anti-EpCAM-Antikörper zu PBMC-Zellen hinzu und beobachten Sie ihn unter einem Fluoreszenzmikroskop. Zirkulierende CTCs exprimieren einen Zellmarker, der als Epithelial Cell Adhesion Molecule oder EpCAM bekannt ist. Daher können Anti-EpCAM-Antikörper helfen, EpCAM-positive CTCs zu identifizieren.

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