Kolorektales Karzinom

Dieses Video beschreibt das Verfahren zur Gewinnung von Tumorzellsuspensionen aus patienteneigenen Xenotransplantat- oder PDX-Krebsmausmodellen. Kleintiermodelle bieten eine schnelle, reproduzierbare und anpassungsfähige Plattform, um das Fortschreiten von Tumoren und verschiedene Metastasierungsmuster zu untersuchen.

Das Video beschreibt die Laserdissektion des 3D-organotypischen Co-Kulturmodells mit Präzision im Mikrometerbereich. In organotypischen 3D-Modellen werden stromale Bestandteile wie Fibroblasten 3-dimensional mit Krebsepithelzellen kokultiviert. Das 3D-Modell dient als experimentelles Werkzeug, mit dem Invasion und Krebs-Stroma-Wechselwirkungen unter nahezu physiologischen Bedingungen untersucht werden können.

Dieses Video beschreibt die Technik zur Untersuchung des Zytoskeletts und der fokalen Adhäsionen in primären menschlichen Dickdarmkrebszellen, um seine Variationen in Abhängigkeit von der Substratsteifigkeit zu verstehen. Diese Kultur von Krebszellen auf weichen und harten Substraten ermöglicht verschiedene nachgelagerte biophysikalische Messungen zur Krebsprognose.

Sphäroide sind eine Art von 3D-Zellkulturmodell, das verwendet wird, um die Umgebung einer Zelle im Vergleich zu 2D-Zellkultur-Monolayer-Modellen genauer darzustellen. Im Beispielprotokoll werden wir sehen, wie Wissenschaftler Sphäroide aus einer Darmkrebszelllinie erzeugen und Lebendzell-Imaging anwenden, um das Wachstum der Sphäroide zu verfolgen.

Dieses Video beschreibt den Mikrotubuli-bindenden Assay, der verwendet wird, um das Mikrotubuli-bindende Tau-Protein von nicht-bindenden hyperphosphorylierten Tau-Proteinfraktionen in Darmkrebszellen zu trennen. Dieser Assay hilft bei der Bestimmung der Wirkung verschiedener Chemikalien, die den Phosphorylierungsstatus des Tau-Proteins verändern und seine Mikrotubuli-Bindung beeinflussen können.

Dieses Video beschreibt das detaillierte Protokoll zur Erzeugung von 3D-Organoiden aus Darmkrebszellen im Mausmodell, indem sie auf künstlichen, mit extrazellulärer Matrix beschichteten Platten vermehrt werden. Diese Darmkrebs-Organoide können als Modell verwendet werden, um das primäre Wachstum und die Metastasierung menschlicher Tumorzellen zu untersuchen.

Dieses Video beschreibt den Zugkraftmikroskopie-Assay. Der Assay bestimmt die zelluläre Traktion von menschlichen Dickdarmkrebszellen auf der extrazellulären Matrix, die auf einem weichen, elastischen Hydrogel mit eingebetteten fluoreszierenden Kügelchen vorhanden ist. Die resultierende Verschiebung der fluoreszierenden Kügelchen wird mit einer entsprechenden Software gemessen.

Dieses Video beschreibt ein detailliertes Protokoll zur Isolierung zirkulierender Tumorzellen aus der Vollblutprobe eines euthanasierten kolorektalen Tumormausmodells. Diese isolierten CTCs können kultiviert und für die vorgesehene Downstream-Analyse verwendet werden.

Dieses Video beschreibt die Technik zur Erzeugung von Darmkrebs-Organoiden, die mit GFP-lentiviralen Partikeln transduziert werden, um die Fluoreszenzbildgebung zu ermöglichen. Diese GFP-markierten Organoide helfen, wenn sie in Tiermodellen platziert werden, die Tumorinvasion und Metastasierung zu untersuchen.

Dieses Video beschreibt die Extraktion von zirkulierender microRNA aus Plasmaproben von Darmkrebspatienten mittels organischer Extraktion, gefolgt von einer Glasfasersäulenanreicherung. miRNAs sind in biologischen Flüssigkeiten wie Serum und Plasma stabil, was sie zu idealen zirkulierenden Biomarkern für die Krebsdiagnose, Prognose und Behandlungsentscheidung und -überwachung macht. Diese Methode wird dazu beitragen, neue zirkulierende Biomarker zu identifizieren, die in der Lage sind,...

Dieses Video beschreibt das Protokoll zum Nachweis der gesamten zellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) unter Verwendung von 2',7'-Dichlordidihydrofluoresceindiacetat (DCFH-DA). Diese Methode hilft dabei, die ROS-Lokalisierung in den adhärenten Zellen mit einem Fluoreszenzmikroskop zu visualisieren und die ROS-Intensität mit einem Fluoreszenzplatten-Reader weiter zu quantifizieren.

Dieses Video beschreibt ein Protokoll zum Nachweis von strahleninduzierten DNA-Reparaturherden in den Dickdarmkrebszelllinien mittels Immunfluoreszenzfärbung. DNA-Reparaturproteine werden an der DNA-Schadensstelle aktiviert; Daher können wir sie mit spezifischen Antikörpern nachweisen und unter einem Fluoreszenzmikroskop sichtbar machen.

Dieses Video beschreibt das DNA-Isolationsprotokoll aus Stuhlproben von Dickdarmtumor-tragenden Mäusen. Die extrahierte DNA wird mittels PCR amplifiziert und das Produkt mit einem auf magnetischen Kügelchen basierenden Ansatz weiter gereinigt. Mit dieser Methode kann der Effekt der Umweltanreicherung auf die Dickdarmmikrobiota und die Tiersterblichkeit bestimmt werden.

Dieses Video beschreibt ein Protokoll zur Beurteilung des Phosphorylierungsstatus des Tau-Proteins durch einen Phosphatase-Assay in Darmkrebszellen. Das Phosphatase-Enzym wirkt auf die auf dem Tau-Protein vorhandenen Phosphatgruppen und erhöht die Mobilität des Tau-Proteins auf dem SDS PAGE-Gel im Vergleich zu den unbehandelten Tau-Proteinproben.

Das Video beschreibt die Technik zur intrazikalen Injektion von Krebszellen, um ein orthotopes Mausmodell mit hochgradig einheitlichen Tumoren zu entwickeln. Daher ermöglicht das orthotope Mausmodell eine realistische Simulation der Metastasierung und stellt ein wertvolles Werkzeug dar, um die Phänotypveränderungen während des Tumorwachstums und der Tumorverbreitung zu untersuchen.

Dieses Video beschreibt die Generierung eines kolorektalen Mausmodells durch segmentale Adeno-Cre-Infektion. Das infizierte Dickdarmsegment führt zu einer Tumorgenese innerhalb dieses Segments der Schleimhaut, was dazu führt, dass die Adenome schließlich zu invasiven und metastasierten Karzinomen fortschreiten. Dieses Modell ist eine attraktive Plattform für Studien zur Krebsbiologie und präklinische therapeutische Studien.

Dieses Video beschreibt die Technik der präzielgerichteten Radioimmuntherapie oder PRIT, bei der Immunkonjugate gefolgt von Radioliganden zur Behandlung von Tumoren verabreicht werden. Diese Radioimmuntherapie reduziert die Strahlendosis für gesundes Gewebe und verwendet Radionuklide mit sehr geringen Halbwertszeiten, die mit antikörperbasierten Vektoren inkompatibel sind.

Dieses Video beschreibt das Protokoll zur Erzeugung von Metastasen durch die PDX-abgeleiteten CRC-Organoide, die mit GFP-Lentiviren markiert wurden, in die Milz einer immundefizienten Maus. Krebsmikrometastasen, die andere Organe besiedeln, können mit einem Fluoreszenzmikroskop nachgewiesen werden, um die GFP-Expression zu beurteilen.

Dieses Video beschreibt das Protokoll zur Etablierung eines spontanen Metastasen-Mausmodells von Xenotransplantaten oder PDXs von Darmkrebspatienten. Diese Xenotransplantatmodelle ahmen teilweise die Merkmale menschlicher Karzinome nach und verstehen die kritischen Aspekte menschlicher Malignome, einschließlich Invasion und Metastasierung.

Dieses Video beschreibt das detaillierte Protokoll für die Darmresektion in einem Mausmodell. Diese Technik bietet Einblicke in die durch Ileektomie induzierte Gallenmalabsorption, Überakkumulation und Toxizität im Darm der Maus.

Dieses Video beschreibt das Protokoll zur Generierung eines von Patienten abgeleiteten orthotopen Xenotransplantat-Darmkrebs-Mausmodells, um das Fortschreiten von Darmkrebszellen bei nicht-adipösen diabetischen/schweren kombinierten Immundefizienzmäusen (NOD/SCID) zu untersuchen. Dieses Mausmodell hilft beim Verständnis des Primärtumorwachstums und des Metastasenmusters.