Keratinozytenisolierung in der menschlichen Haut: Eine Methode zur Kultivierung primärer Keratinozyten aus Hautproben

- Keratinozyten sind die prominentesten Zellen in der Epidermis oder der äußersten Schicht der Haut. Sie ordnen sich in mehreren Schichten über der Dermis an und sind mit verschiedenen anderen Zelltypen wie Melanozyten, dendritischen Zellen und Merkelzellen assoziiert.

Um Keratinozyten zu isolieren, beginnen Sie mit der Entnahme des epidermalen Gewebes aus der menschlichen Haut. Anschließend mit einem enzymatischen Verdauungspuffer behandeln. Enzyme im Puffer bauen die im Epidermisgewebe vorhandenen Proteine der extrazellulären Matrix ab und initiieren so die Zelldissoziation. Fügen Sie nun ein geeignetes Medium hinzu und zerkleinern Sie das Gewebe mechanisch.

Um die dissoziierten Zellen in Suspension freizusetzen, filtrieren Sie die epidermale Zellsuspension durch ein Sieb, um Zellklumpen oder Ablagerungen zu entfernen. Zentrifugieren Sie, um die Epidermiszellen zu pelletieren und sie vom enzymhaltigen Überstand zu trennen. Entfernen Sie den Überstand und resuspendieren Sie die Zellen mit einem bevorzugten Keratinozyten-Wachstumsmedium. Kultivieren Sie die Zellen für die gewünschte Dauer.

Während der Kultur bereichern die optimierten Medien die Expansion der Keratinozyten, indem s