Subkutaner Transplantationsassay: Eine Methode zur Transplantation von Melanomzellen von einem Spender in ein Empfänger-Zebrafischmodell
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Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:05 Min. • April 30th, 2023
- Während des Melanomtransplantationsassays werden Krebszellen von tumortragenden Zebrafischen in ein immungeschwächtes Empfängermodell transplantiert, um die Tumorentwicklung zu untersuchen. Beginnen Sie damit, einen euthanasierten tumortragenden Zebrafisch zu entnehmen und den Tumor chirurgisch aus seinem Körper zu entfernen. Den Tumor in eine Petrischale mit einem geeigneten Puffer geben und in kleine Stücke zerkleinern.
Als nächstes zerreiben Sie die Tumorfragmente mit einer Pipette. Dadurch werden die Tumorstücke in einzelne Zellen zerlegt. Laden Sie nun die Tumorzellsuspension in eine Spritze. Bereiten Sie anschließend einen immungeschwächten Empfänger-Casper-Zebrafisch auf einem Filterpapier vor. Dieser pigmentdefizienten, mutierten Variante des Zebrafisches fehlen Melanozyten und Iridophoren, was sie transparent und vielseitig für Bildgebungs- und Transplantationsexperimente macht.
Als nächstes injizieren Sie die vorgeladene Melanomzellsuspension subkutan in den Bereich über der Bauchhöhle, auf halbem Weg zwischen dem Hinterhirn und der Rückenflosse des Casper-Zebrafisches. Setzen Sie nun den Empfängerfisch ins Wasser und überwachen Sie ihn, um die Tumorentwicklung zu beoba
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