Name: Technik zu pilzförmigen (Taste) Papillen aus menschlichen Zunge sammeln (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-09-18T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Lernen Sie eine minimal-invasive Biopsiemethode zur Gewinnung fungiformer Papillen von der menschlichen Zunge. Diese Technik ermöglicht molekulare und histologische Analysen menschlicher Geschmacksgewebe.

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Diese Arbeit wurde vom NIH R21 DC03969-01 (zu JGB) unterstützt. Wir danken Herrn Dr. Fritz Lischka für die Erfassung von einzelnen Geschmacksknospe Zellen, Dr. Tauf Huque für die Durchführung der RT-PCR in Abbildung 4B und Herr D. Bayley und Frau S. Alarcon für die technische Unterstützung gezeigt. M. Yanina Pepino ist ein Kerl von einem NIDAT32 DA07313 Washington University School of Medicine, St. Louis, MO (Cottler, LB PI) unterstützt.

<ol><li>Breslin, P. A., Spector, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+taste+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Mammalian taste perception.</a> Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).</li>
<li>Miller, I. Anatomy of the peripheral taste system. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMiller%2C+I+%22Handbook+of+Olfaction+and+Gustation%22">Handbook of Olfaction and Gustation</a>. Doty, R. I., Dekker, M. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).</li>
<li>Figure 12.67. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Gray%27s+Anatomy%3A+The+Anatomical+Basis+of+Medicine+and+Surgery%22">Gray's Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery</a>. , 38th Edition, Churchill Livingstone. New York. (1995).</li>
<li>Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sour+ageusia+in+two+individuals+implicates+ion+channels+of+the+ASIC+and+PKD+families+in+human+sour+taste+perception+at+the+anterior+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue.</a> PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).</li>
<li>MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patch-clamping+of+taste+cells+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Biology+of+Taste+and+Olfaction%22%5BJournal%5D)">Patch-clamping of taste cells in mouse.</a> Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. Spielman, A. I., Brand, J. G. , CRC Press. Boca Raton, FL. 329-332 (1995).</li>
</ol>

Ein bemerkenswerter Vorteil der Verwendung von menschlichen Zellen ist ihre Spezifität. Das Verfahren hier im Detail beschrieben bietet Zunge Gewebe für die Isolierung des Geschmacks-Rezeptor-Zellen aus Mensch. Diese Geschmacks-Zellen können für molekulare Studien eingesetzt werden, suche, um Moleküle wichtig für die Transduktion des Geschmacks Informationen zu entdecken, und für die Kalzium-Imaging-Studien, die Geschmack-Zell-Aktivität zu überwachen, um Reize. Darüber hinaus kann die Zunge Gewebe durch dieses Verfahren...

<table><tbody><tr><td>McPherson-Vannas. Gekrümmte, scharfe Schneidkante 5 mm. Kamm, Spitzenbreite 0,2 mm, Gesamtlänge 3&quot;</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5603, Roboz</td><td></td></tr><tr><td>Kleine Dumont-Pinzette</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-4915, Roboz</td><td></td></tr></tbody></table>

technik zu pilzförmigen (taste) papillen aus menschlichen zunge sammeln

Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue

Der Geschmackssinn ist von entscheidender Bedeutung für das menschliche Leben. Er informiert den Körper über die Qualität von Lebensmitteln, die möglicherweise verschluckt werden und regt Stoffwechselprozesse, die den Verdauungstrakt Vorbereitung für die Verdauung. Stetige Fortschritte auf dem Weg zu Verständnis der frühen biochemischen und molekularen Ursachen Geschmack Transduktion (für eine Übersicht, Breslin und Spector, 2008 1) hergestellt. Allerdings hat die bisherigen Fortschritte im Wesentlichen aus Tiermodellen geführt. Doch, da deutliche Unterschiede in der Rezeptor-Spezifität und Rezeptor-Dichte zwischen den Arten variieren, wird die menschliche Geschmack Transduktion nur mit menschlichen Geschmack Gewebe verstanden werden. Hier beschreiben wir eine Biopsie-Technik für die menschliche pilzförmigen Papillen, sichtbar als runde rosa vorderen Strukturen, etwa 0,5 mm im Durchmesser zu sammeln, die Geschmacksknospen enthalten. Diese biopsiert Papillen sind für verschiedene Zwecke einschließlich der Trennung von lebensfähigen Geschmacksknospe Zellen in situ Hybridisierung, Immunhistochemie und durch Techniken der Molekularbiologie, die Identifizierung des Geschmacks-spezifische neuartige Proteine ​​verwendet.

Die Kenntnis der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen Geschmacks Transduktion hat kürzlich bedeutende Fortschritte genossen, vor allem aufgrund der Verwendung von Tiermodellen. Doch die große Vielfalt in Geschmack Sensitivität und Spezifität bei Säugetieren Optionsscheinen Studien in menschlichem Gewebe. Wir beschreiben eine Biopsie-Technik auf lebende Geschmack Zellen aus der Papillen auf die menschliche Zunge zu sammeln.

Technik zu pilzförmigen (Taste) Papillen aus menschlichen Zunge sammeln

Der Geschmackssinn ist für das menschliche Leben von entscheidender Bedeutung. Er informiert den Körper über die Qualität der Nahrung, die potenziell aufgenommen wird, und stimuliert den Stoffwechsel ...

Das allgemeine Ziel dieses Verfahrens besteht darin, menschliche Pilzformen vom Zungenrücken zu entfernen. Dies wird erreicht, indem zunächst ein steriler Gores-Pad um das vordere Viertel der Zunge gewickelt und mit der linken Hand festgehalten wird. Vorsichtig drücken Sie mit dem linken Zeigefinger von unten gegen die Zunge, sodass sich die Zunge darüber spannt und die gezielten Pilzformen am Zungenrücken freigelegt werden.Der zweite Schritt des Verfahrens besteht darin, 0,25 Milliliter eines 2 %igen Lidocain-Anästhetikums in den dorsalen Bereich der Zunge distal zur Entnahmestelle zu injizieren. Warten Sie drei Minuten, bis die Anästhesie wirkt. Der dritte Schritt des Verfahrens ist die Entfernung der Papille; hierbei erfolgt das Schneiden mit dem innersten Segment der Klingen nahe der Gabelung.Platzieren Sie die Schere mit geöffneten Klingen über der Zielstruktur pro Säule, während Sie das umgebende Gewebe nach unten drücken, sodass die betreffende Papille zwischen den Klingen hervortritt; schneiden Sie dann mit einer einzigen schnellen Bewegung. Vermeiden Sie es, die Scherspitze zum Schneiden zu verwenden. Der letzte Schritt des Verfahrens besteht darin, die durchtrennte Säule

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir wollten eine reproduzierbare Protokoll für die Isolierung und die Pflege langfristiger Kulturen von humanen pilzförmigen Papillen Geschmack Zellen zu entwickeln. Zellen aus menschlichen fungiformen Papillen durch Biopsie gewonnen wurden erfolgreich in der Kultur mehr als acht Durchgängen (12 Monate) aufrecht erhalten, ohne Verlust der Lebensfähigkeit.

Isolierung und Kultivierung humaner Zellen pilzförmige Papillen Geschmack

In diesem Video beschreiben wir die Isolierung von zirkumvallaten Papillen (CVP) Epithel aus einer Mauszunge.

Isolierung von zirkumvallaten Papillen (CVP) Epithel aus Mausmodell: Ein enzymatisches Verfahren zur Trennung von CVP-Epithel aus der Mauszunge

Oral Chemorezeption von Fettsäuren und die Verbindung mit Diät und fetthaltige Lebensmittel Präferenzen können die Identifizierung von Mechanismen, mit der Entwicklung von Übergewicht und warum Veränderungen in der Ernährung kann es schwierig für viele Menschen beteiligt sein können.

Mess Oral-Fettsäure-Schwellenwerte, Fett Wahrnehmung, Fatty Essen gefallen, und Papillen Dichte in Humans

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um pilzförmige Papillen Dichte von digitalen Fotos zu messen. Diese Methode baut Priorisierung und objektives Merkmal Metriken in den ursprünglichen Beschreibungs Arbeit an pilzförmigen Papillen von Miller &amp; Reedy (1990).

Denver Papillen Protokoll für objektive Analyse der pilzförmige Papillen

Dieses Protokoll menschlichen Geschmack Antworten und umfasst eine kurze anatomische Einschätzung und eine kurze Geschmackstest eine Validierungsmethode über das Thema berichteten Gefühl und Geschmack-Rezeptor-Genotyp.

Geschmack-Prüfung: Eine kurze und validierten Test

Diese Arbeit beschreibt Methoden zur Gewebevorbereitung, Färbung und Analyse von ganzen Fungiform-, Zirkumvallat- und Gaumengeschmacksknospen, die konsistent ganze und intakte Geschmacksknospen (einschließlich der Nervenfasern, die sie innervieren) ergeben und die Beziehungen zwischen Strukturen innerhalb der Geschmacksknospen und der umgebenden Papille aufrechterhalten.

Färbung, Visualisierung und Analyse von Fungiform-, Circumvallate- und Gaumengeschmacksknospen

Der Artikel stellt das μTongue-Gerät (Microfluidics-on-a-Tongue) für die funktionelle Geschmackszellbildgebung in vivo vor, indem die Mikrofluidik in ein intravitalen Bildgebungsfenster auf der Zunge integriert wird.

μTongue: Eine mikrofluidikbasierte funktionelle Bildgebungsplattform für die Zunge in vivo

Die Versorgung von Typ-2-Diabetes Inseln für die Forschung ist nicht ausreichend. Hier teilen wir unser Protokoll zur Isolierung von Inseln aus Patienten partielle Pankreatektomie. Dieser Ansatz stellt einen einzigartigen Ort für den Erhalt von kleinen Inseln von Typ 2 Diabetes und klinisch abgestimmt nicht-diabetischen Patienten in ausreichender Zahl für die Grundlagenforschung und klinische Studien.

Isolierung humaner Inselzellen aus teilweise Pankreatektomierten

Das Papier beschreibt ein vereinfachtes Verfahren zur Hornhaut-und Verbrauchssteuern zu retinalen Gewebe aus dem Augapfel von menschlichen Leichen Spendern auszuhöhlen. Die hier beschriebene Technik wird verbrauchsteuerpflichtige guter Qualität zu Geweben zur Transplantation oder chirurgische Zwecke oder Forschungszwecke ohne Beschädigung anderer Gewebe des Augapfels verwendet werden zu helfen.

Ein vereinfachtes Verfahren für<em&gt; In-situ</em&gt; Exzision der Hornhaut und der Netzhaut Ausweiden von Gewebe aus menschlichen Augapfel

Der Zweck dieses Videos ist es, die modifizierte Bergström-Skelettmuskelbiopsietechnik an menschlichen Probanden zu präsentieren.

Menschlichen Skelettmuskelbiopsie Verfahren unter Verwendung der modifizierten Technik Bergström

Lernen Sie eine minimal-invasive Biopsiemethode zur Gewinnung fungiformer Papillen von der menschlichen Zunge. Diese Technik ermöglicht molekulare und histologische Analysen menschlicher Geschmacksgewebe.

Technik zu pilzförmigen (Taste) Papillen aus menschlichen Zunge sammeln

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