Name: Die Anwendung eines NMDA-Rezeptor-Leitwert in Rat Mittelhirn dopaminergen Neuronen Mit der Dynamic-Clamp-Technik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-21T15:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 42 s
Description: Lernen Sie die Dynamic-Clamp-Technik zur präzisen Steuerung von NMDA-Rezeptor-Leitwerten in dopaminergen Neuronen der Ratte. Diese Methode ermöglicht Echtzeit-Manipulation neuronaler Aktivität.

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1. Slice-Vorbereitung <ol><li> Cut Hirnschnitten mit Hilfe eines vibrierenden Mikrotom. Wir bereiteten 240 um horizontale Mittelhirn Scheiben aus einer Isofluran-anethetized Sprague-Dawley Ratten (Charles River Laboratories) mit einem vibrierenden Mikrotom (Microm HM 650V) im Einklang mit der University of Texas at San Antonio Institutional Animal Care und Verwenden Committee. </li><li> Halten Sie die Scheiben in eine Inkubationskammer, bis Sie zur Aufnahme bereit sind. Wir verwenden eine Inkubationszeit Behälter erwärmt auf 32 ° C und mit künstlicher Liquor (aCSF; in mM): 126 NaCl, 2,5 KCl, 1,25 NaH 2 PO 4, 4 MgCl 2, 2 CaCl 2, 10 Dextrose, 25 NaHCO 3, 1,3 Ascorbinsäure, 2,4 Natriumpyruvat und 0,05 Glutathion. </li></ol> 2. Elektrophysiologische Recording <ol><li> Übertragen Sie die Scheibe, um die intrazelluläre Aufnahme rig, in denen eine künstliche Liquor (aCSF) bei 35 ° C wird durchblutet ist. Wir benutzen die gleichen aCSF wie in 1.2, außer dass 2 mM MgCl 2 verwendet wurde und Glutathion wurde verzichtet. Für horizontal vorbereitet Scheiben, wir in der Regel halbieren die Scheibe entlang der Mittellinie. </li><li> Visualisieren Sie die Zielneuron. Wir visualisieren einzelnen Substantia nigra dopaminergen Neuronen mit einem Gradienten Gegensatz Imaging-System. </li><li> Ziehen Sie eine Elektrode mit einem elektronischen Elektrode Abzieher. Wir ziehen Elektroden mit einer Spitze Widerstand von 4-10 MOhm mit einer P97 Micropipette Puller (Sutter Instrument Company). </li><li> Füllen Sie eine Elektrode mit der gewünschten internen Lösung. Wir verwenden eine Lösung, die (in mM): 138 K-Gluconat, 10 HEPES, 2 MgCl 2, 0,2 EGTA, 0,0001 CaCl 2, 4 Na-ATP, 0,4 Na-GTP. Die interne Lösung wurde auf einen pH von 7,3 mit 1 M KOH und einer Osmolarität von 270-275 mOsms angepasst. </li><li> Machen Sie eine Gigaohm Dichtung auf die gewünschte Neuron. Rupture die Dichtung mit Absaugung. Dies stellt eine ganze Zelle Aufnahme. Ein Multiclamp 700B Verstärker wurde in unserer Konfiguration verwendet. Der Verstärker sollte dann in Stromzange die "I = 0"-Modus versetzt werden. </li></ol> 3. Leitwert Anwendung mit Dynamic Clamp <ol><li> RTXI (www.rtxi.org) wurde auf dem dynamischen Clamp-Computer ausgeführt. Eine benutzerdefinierte geschrieben Modell mit einem NMDA-Rezeptor wurde in den Speicher geladen. Der Strom in der Zelle in Echtzeit injiziert wird durch die folgende Gleichung berechnet: Ich NMDA =-g NMDA * [1 / (1 ​​+ ([Mg] / 3,57) * e (-V m * 0,062))] * (V m - E NMDA), wo g NMDA ist die gewünschte Leitfähigkeit (in nS; standardmäßig auf 0 gesetzt nS), [Mg] ist die Magnesium-Konzentration (auf 1,5 mm in unserem Beispiel unten), ist E NMDA die Umkehrung Potenzial für den NMDA-Rezeptor (auf 0 mV) und V m wird das Membranpotential der Zelle aus dem Verstärker gemessen (in Millivolt). </li><li> Der Ausgang aus der dynamischen Clamp-Computer wurde die Command-Eingang des Verstärkers über einen Analog-Digital-Wandler verbunden. </li><li> Der Verstärker wurde in Stromzange der "IC"-Modus versetzt. </li><li> Geben Sie die gewünschte NMDA-Rezeptor-Leitwert in RTXI (zB 40ns). Sie sollten eine phasische Burst von Aktionspotentialen. Alternativ kann eine Leitfähigkeit bis RTXI über einen analogen Ausgang (Abbildung 1A, 'g (t)') angegeben werden. Eine entsprechende Skalierungsfaktor muss innerhalb RTXI verwendet werden, um das Signal von Volt an Siemens zu konvertieren. </li></ol> 4. Repräsentative Ergebnisse Ein erfolgreiches Setup für die Anwendung einer Leitfähigkeit unter Verwendung der dynamischen Klammer ist in Abbildung 1A dargestellt. Mit diesem Setup haben wir eine ganze Zelle somatischen Aufnahme von einem dopaminergen Neuronen in der Substantia nigra pars compacta. Dopaminergen Zellen in der Regel spontan Feuer zu günstigen Preisen mit einem Herzschrittmacher-ähnliches Muster. Ein Burst von Aktionspotentialen kann durch phasische Anwendung eines NMDA-Rezeptor-Leitwert mit dynamischen Klemme (Abbildung 1B) hervorgerufen werden. <img src="/files/ftp_upload/2275/2275fig1.jpg" alt="Abbildung 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Abbildung 1"> Abbildung 1: Anwendung eines NMDA-Rezeptor-Leitwert mit dem dynamischen Clamp-Technik. A. Hardware-Setup, welches die Verbindungen zwischen den intrazellulären Aufnahme rig und dynamische Clamp-Computer. B. Ein Burst von Aktionspotentialen wird durch Anwendung eines 40ns NMDA-Rezeptor-Leitwert in einer ganzen Zelle Aufnahme von einem Substantia nigra pars compacta dopaminergen Neuronen hervorgerufen werden.

<ol><li>Robinson, H. P., Kawai, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+of+digitally+synthesized+synaptic+conductance+transients+to+measure+the+integrative+properties+of+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Injection of digitally synthesized synaptic conductance transients to measure the integrative properties of neurons.</a> J Neurosci Methods. 49, 157-165 (1993).</li>
<li>Sharp, A. A., O'Neil, M. B., Abbott, L. F., Marder, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dynamic+clamp%3A+artificial+conductances+in+biological+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The dynamic clamp: artificial conductances in biological neurons.</a> Trends Neurosci. 16, 389-394 (1993).</li>
<li>Sharp, A. A., O'Neil, M. B., Abbott, L. F., Marder, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+clamp%3A+computer-generated+conductances+in+real+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Dynamic clamp: computer-generated conductances in real neurons.</a> J Neurophysiol. 69, 992-995 (1993).</li>
<li>Prinz, A. A., Abbott, L. F., Marder, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dynamic+clamp+comes+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The dynamic clamp comes of age.</a> Trends Neurosci. 27, 218-224 (2004).</li>
<li>Deister, C. A., Teagarden, M. A., Wilson, C. J., Paladini, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+intrinsic+neuronal+oscillator+underlies+dopaminergic+neuron+bursting%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">An intrinsic neuronal oscillator underlies dopaminergic neuron bursting.</a> J Neurosci. 29, 15888-15897 (2009).</li>
<li>Lobb, C. J., Wilson, C. J., Paladini, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dynamic+role+for+GABA+receptors+on+the+firing+pattern+of+midbrain+dopaminergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">A dynamic role for GABA receptors on the firing pattern of midbrain dopaminergic neurons.</a> J Neurophysiol. 104, 403-413 (2010).</li>
</ol>

Die dynamische Clamp-Technik demonstriert hier eine Verbesserung gegenüber der traditionellen Technik der direkten Stromeinspeisung, indem der Experimentator die elektrischen Effekte der Aktivierung eines Rezeptors zu imitieren. In diesem Video haben wir gezeigt, dass man die Effekte hinzufügen Aktivierung von NMDA-Rezeptor, die spontane Aktivität der dopaminergen Neuronen, dh ein Platzen der Aktionspotentiale hervorgerufen werden. Durch die Flexibilität der Hardware / Software-Implementierung kann eine Vielzahl von Erweiterungen verwendet werden. Das Zeichen des injizierten Strom von negativ auf positiv geschaltet werden, was einem Szenario, in dem die Auswirkungen der aktivierten Rezeptor von einem Neuron entfernt wird. Modell Neuronen, in Form einer Reihe von Differentialgleichungen dargestellt werden, können auch numerisch gelöst werden und erlauben es dem Forscher, kleine Netzwerke zu untersuchen.

<table><tbody><tr><td>K-Gluconat, wasserfrei</td><td>Reagenz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Reagenz</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; × 2H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td>Reagenz</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ethylenglykol-bis(B-amin&amp;#8211;ethyl-ether)-N,N,N&amp;rsquo;,N&amp;rsquo;-tetraessigsäure</td><td>Reagenz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MgATP</td><td>Reagenz</td><td>MP Biomedicals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaGTP</td><td>Reagenz</td><td>MP Biomedicals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MgCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td><td>Reagenz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaHCO&lt;sub&gt;3&lt;/sub&gt;</td><td>Reagenz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Reagenz</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;, wasserfrei</td><td>Reagenz</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glukose</td><td>Reagenz</td><td>Acros Organics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Reagenz</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CholCl</td><td>Reagenz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Natriumpyruvat</td><td>Reagenz</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ascorbinsäure</td><td>Reagenz</td><td>Acros Organics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glutathion</td><td>Reagenz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Olympus BX51WI Mikroskop (mit 40x-Objektiv)</td><td>Mikroskop</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 A/D-Wandler</td><td>Ausstattung</td><td>beliebiger Anbieter</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Multiclamp 700B mit CV-7B Kopfverstärker</td><td>Ausstattung</td><td>Molecular Devices</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P-97 Flaming/Brown-Mikropipettenzieher</td><td>Ausstattung</td><td>Sutter Instrument Co.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikrofil-Spritzenkanülen</td><td>Ausstattung</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikromanipulator</td><td>Ausstattung</td><td>Siskiyou, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Monitor</td><td>Ausstattung</td><td>Triview</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

die anwendung eines nmda-rezeptor-leitwert in rat mittelhirn dopaminergen neuronen mit der dynamic-clamp-technik

Application of a NMDA Receptor Conductance in Rat Midbrain Dopaminergic Neurons Using the Dynamic Clamp Technique

Neurowissenschaftler untersuchen die Funktion des Gehirns durch die Untersuchung, wie Nervenzellen im Gehirn kommunizieren. Viele Forscher betrachten Veränderungen in der elektrischen Aktivität eines oder mehrerer Neuronen in Reaktion auf eine experimentell-Eingang auf. Die elektrische Aktivität der Neuronen kann in isolierten Hirnschnitten mittels Patch-Clamp-Techniken mit Glasmikropipetten aufgezeichnet werden. Traditionell können Experimentatoren neuronalen Input durch direkte Injektion der aktuellen imitieren durch die Pipette, die elektrische Stimulation des anderen Zellen oder verbleibende axonalen Verbindungen in der Scheibe, oder pharmakologische Manipulation durch Rezeptoren auf der neuronalen Membran der aufgenommenen Zelle. Gleichstrom Injektion hat den Vorteil, daß man eine vorgegebene Stromform mit hoher zeitlicher Präzision auf dem Gelände der Aufnahme (in der Regel die Soma). Allerdings ist es nicht ändern, der Widerstand der neuronalen Membran, da keine Ionenkanäle physisch geöffnet werden. Aktuelle Injektion in der Regel beschäftigt Rechteckimpulse und damit nicht-Modell die Kinetik der Ionenkanäle. Schließlich können Stromeinspeisung nicht imitieren die chemischen Veränderungen in der Zelle, die mit der Öffnung von Ionenkanälen auftritt. Rezeptoren können physikalisch durch elektrische oder pharmakologische Stimulation aktiviert werden. Der Versuchsleiter hat eine gute zeitliche Präzision der Rezeptoraktivierung mit elektrischer Stimulation der Scheibe. Allerdings gibt es nur begrenzte räumliche Präzision der Rezeptor-Aktivierung und die genaue Natur dessen, was nach Stimulation aktiviert ist unbekannt. Das letztere Problem kann teilweise durch spezifische pharmakologische Wirkstoffe gelindert werden. Leider ist der zeitliche Verlauf der Aktivierung von pharmakologischen Wirkstoffen in der Regel langsam und die räumliche Genauigkeit der Eingänge auf die aufgenommenen Zelle ist unbekannt. Die dynamische Clamp-Technik ermöglicht ein Experimentator auf die aktuelle Veränderung gingen direkt in die Zelle basierend auf Echtzeit-Feedback der Membran der Zelle (Robinson und Kawai 1993, Sharp et al, 1993a, b;. Für eine Übersicht siehe Prinz et al. 2004). Dies ermöglicht ein Experimentator auf der elektrischen Veränderungen, die auf dem Gelände der Aufnahme treten als Reaktion auf die Aktivierung des Rezeptors zu imitieren. Real-time Veränderungen in der angewandten Strom werden durch eine mathematische Gleichung in Hardware implementiert bestimmt. Wir haben vor kurzem die dynamische Clamp-Technik verwendet, um die Erzeugung von Bursts von Aktionspotentialen durch phasische Aktivierung von NMDA-Rezeptoren in dopaminergen Neuronen der Substantia nigra pars compacta (Deister et al, 2009.; Lobb et al, 2010.) Zu untersuchen. In diesem Video zeigen wir die Verfahren benötigt, um eine NMDA-Rezeptor-Leitwert in einer dopaminergen Neuronen gelten.

In diesem Video zeigen wir, wie man einen Leitwert in einem dopaminergen Neuronen in der ganzen Zelle Konfiguration in Hirnschnitten der Ratte festgestellt werden. Diese Technik nennt man das dynamische Klemme.

Die Anwendung eines NMDA-Rezeptor-Leitwert in Rat Mittelhirn dopaminergen Neuronen Mit der Dynamic-Clamp-Technik

Neurowissenschaftler untersuchen die Funktion des Gehirns, indem sie erforschen, wie Neuronen im Gehirn kommunizieren. Viele Forscher betrachten Veränderungen in den ...

Neurowissenschaftler untersuchen die Funktion des Gehirns, indem sie erforschen, wie Neuronen im Gehirn miteinander kommunizieren. Hier werden Änderungen der elektrischen Aktivität eines einzelnen Neurons hervorgerufen, indem eine experimentell gesteuerte Leitfähigkeit mittels der Dynamic-Clamp-Technik angewendet wird. Zunächst werden dünne Gehirnschnitte geschnitten und in einer Inkubationskammer aufbewahrt, die mit künstlichem zerebrospinalen Liquor gefüllt ist.Ein Schnitt wird anschließend auf eine Patch-Clamp-Aufnahmekonfiguration übertragen. Ein Neuron wird ausgewählt und dann mit einer Ableitelektrode über einen dynamischen Clamp-Computer, der mit dem Aufnahmeverstärker verbunden ist, verschaltet. Eine NMDA-Rezeptorleitfähigkeit wird in die Zelle eingeleitet.Die resultierenden Aufnahmen zeigen einen Schub von Aktionspotentialen, was darauf hindeutet, dass die Aktivierung von NMDA-Rezeptoren ein zellulärer Mechanismus ist, über den dopaminerge Neuronen Schübe erzeugen können. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber gegenwärtigen Methoden wie direkter Strominjektion oder pharmakologischer Behandlung besteht darin, dass wir präzise die Effekte der Aktivierung eines experimentell definierten Rezeptors auf die elektrische Aktivität eines lebenden Neurons bestimmen können. Nachdem das Gehirn rasch aus einer anästhesierten Bragg-dolly-Ratte entnommen wurde, wurden mithilfe eines vibrierenden Mikrotoms 240 Mikrometer dicke horizontale Gehirnschnitte angefertigt.Während die Schnitte angefertigt werden, verwenden Sie eine Transferpipette, um sie in eine Inkubationskammer mit einer Temperatur von 32 Grad Celsius zu bringen, die mit künstlichem zerebrospinalen Flüssigkeit gefüllt ist, bis die Aufnahmeexperimente durchgeführt werden. Die Apparatur für intrazelluläre Ableitungen besteht aus einem Mikroskop mit Objektiven für die Kontrastverfahren nach dem Gradientenprinzip, einem Monitor, einem Perfusionsystem, einem Multiclamp-700-B-Verstärker, einem Analog-Digital-Konverter, einem Mikromanipulator und einer Kopfstufe. Ein Mac-Pro-Computer führt die Datenerfassungssoftware Axo Graph X und die Multiclamp-Commander-Software aus, die neben der Apparatur für intrazelluläre Ableitungen und dem Mac-Pro-Computer steht ein Sun-Microsystems-Computer, der Echtzeit-Linux ausführt, zusammen mit seinem Analog-Digital-Konverter, der für die dynamische Klemmtechnik verwendet wird.Die intrazelluläre Ableitmahlage sollte eine künstliche zerebrospinale Flüssigkeit bei etwa 35 Grad Celsius perfundieren. Falls die aufgezeichnete Schnittpräparation horizontal hergestellt wurde, verwenden Sie eine Transferpipette, um sie in eine Petrischale mit künstlicher zerebrospinaler Flüssigkeit zu geben, und teilen Sie die Schnittpräparation mithilfe eines Schneidwerkzeugs entlang der Mittellinie. Verwenden Sie anschließend eine Pipette, um die Schnittpräparation auf die intrazelluläre Ableitmahlage zu überführen, um elektrophysiologische Ableitungen durchzuführen.Visualisieren Sie mit dem 40x-Objektiv das Zielneuron, hier ist ein einzelnes dopaminerges Neuron des Substantia-nigra-Gebiets zu sehen. Beachten Sie den elliptisch geformten Zellkörper mit zwei auslaufenden Dendriten. Ziehen Sie mit einem elektronischen Mikropipettenzieher (P 97) Elektroden mit einem Spitzenwiderstand von vier bis 10 Megaohm.Als Nächstes füllen Sie mit einer Mikrofüll-Spritzennadel eine Elektrode mit der internen Lösung. Führen Sie die gefüllte Elektrode mit Hilfe einer Spritze, die über ein kurzes Stück Schlauch mit der Halbzelle verbunden ist, in die Halbzelle ein, die an die Kopfstufe des Verstärkers angeschlossen ist. Üben Sie einen geringen positiven Druck auf die Aufnahmeelektrode aus.Unter visueller Kontrolle senken Sie die Elektrode auf das Zielneuron ab. Auf der Zelloberfläche wird eine Delle sichtbar. Geben Sie eine geringe negative Druckmenge an, um eine Giga-Dichtung an dem gewünschten Neuron zu erzeugen.Üben Sie Saugdruck durch den Mund aus, um die Abdichtung zu durchbrechen. Dies stellt eine Ganzzell-Aufzeichnung dar. Nachdem die Abdichtung durchbrochen wurde, verwenden Sie die Software-Schnittstelle des Multiklamm-Kommandanten, um den Verstärker in den Stromklamm-Modus zu schalten, bei dem kein Strom injiziert werden kann.Um eine NMDA-Leitfähigkeit in diese Zelle einzubringen, starten Sie zunächst die RTXI-Software auf dem Dynamic-Clamp-Computer. Laden Sie dann ein benutzerdefiniertes Modell, das einen NMDA-Rezeptor enthält, in den Speicher. Sobald das Modell in den RTXI-Speicher geladen ist, wird der Strom, der in Echtzeit in die Zelle injiziert werden soll, mithilfe der hier gezeigten Gleichung berechnet, wobei G-N-M-D-A die gewünschte Leitfähigkeit in Nanosiemens ist, die auf null Nanosiemens eingestellt ist.Siemens standardmäßig ist MG die Magnesiumkonzentration. E-N-M-D-A ist das Umkehrpotential für den NMDA-Rezeptor, das auf null Millivolt eingestellt ist, und VM ist das Membranpotential der Zelle, gemessen am Verstärker in Millivolt. Verbinden Sie nun mit dem Standard-BNC-Kabel den Ausgang des Dynamic-Clamp-Computers mit dem Befehlseingang des Verstärkers über einen Analog-Digital-Wandler.Stellen Sie den Verstärker mithilfe der Multi Clamp Commander-Software-Schnittstelle in den Standard-Stromklampen-Modus ic. RTXI wurde so eingerichtet, dass es die gewünschte Leitfähigkeit GFT als Spannungssignal von der Axo Graph X-Datenerfassungssoftware empfängt. Hier führen wir ein einfaches AXO Graph X-Protokoll aus, bei dem eine einsekündige Leitfähigkeitsstufe von 40 Nano Siemens auf die Zelle angewendet wird.Mithilfe des in diesem Video beschriebenen Versuchsaufbaus wird ein Aktionspotential-Ausbruch als Reaktion auf einen Leitfähigkeits-Sprung hervorgerufen; dabei wurde eine Ganzzell-Aufzeichnung vom Soma eines dopaminergen Neurons im Substantia-nigra-Pars-compacta-Gebiet durchgeführt. Dopaminerge Zellen feuern typischerweise spontan mit geringer Frequenz in einem schrittmacherähnlichen Muster. Ein Ausbruch von Aktionspotentialen kann durch phasische Anwendung einer NMDA-Rezeptorleitfähigkeit mittels dynamischem Klemmverfahren ausgelöst werden.Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man eine NMDA-Leitfähigkeit in ein lebendes dopaminerges Neuron in einer isolierten Hirnschnittpräparation einbringt. Diese Technik kann jedoch für jeden Zelltyp verwendet werden, der mit standardmäßigen elektrophysiologischen Methoden aufgezeichnet werden kann. Ebenso kann der dynamische Klemmverstärker erweitert werden, um die elektrischen Effekte, aber eine breite Palette von Rezeptortypen nachzuahmen.Wir hoffen, dass dieses Video hilfreich war, um zu zeigen, was die Dynamic-Clamp-Technik ist und wie wir sie in unserem Labor anwenden. Vielen Dank fürs Zuschauen.

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