JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 1:25 Min. • March 4th, 2025
Nehmen Sie fixierte Sehnervenschnitte von einer Kontrollratte und einer Ratte mit Sehnervenverletzung.
Die Kontrollsektion zeigt Axone mit dicht gepackten Myelinscheiden, die konzentrische Plasmamembranschichten enthalten. Der verletzte Abschnitt weist ein dekompaktiertes Myelin mit großen Lücken auf.
Inkubieren Sie mit einem Osmium-Ferrocyanid-Komplex, der an Lipide bindet und den Kontrast der Myelinscheide erhöht.
Mit Thiocarbohydrazid behandeln, um zusätzliche Bindungsstellen für Osmium zu schaffen.
Tragen Sie Osmium erneut auf, um den Lipidkontrast weiter zu verbessern.
Färben Sie mit Schwermetallen, die an Makromoleküle binden und den strukturellen Kontrast verstärken.
Dehydrieren Sie mit zunehmender Alkoholkonzentration und spülen Sie es mit Aceton ab, um das Harz einzubetten.
Betten Sie das Gewebe in Harz ein und beschichten Sie das Harz mit Gold, um die Bildqualität zu verbessern.
Verwenden Sie die serielle Blockflächen-Rasterelektronenmikroskopie, um gleichzeitig zu schneiden und abzubilden. Fokussieren Sie den Elektronenstrahl auf die Oberfläche und detektieren Sie die rückgestreuten Elektronen, um Bilder zu erzeugen.
Myelinscheiden erscheinen dunkel, während Räume innerhalb beschädigter Scheiden heller erscheinen, was eine Unterscheidung zwischen normalem und geschädigtem Myelin ermöglicht.
Diese Studie untersucht die strukturellen Unterschiede in den Myelinscheiden zwischen Kontroll- und verletzten Sehnervabschnitten unter Verwendung fortschrittlicher Bildgebungsverfahren. Die Ergebnisse verdeutlichen die Auswirkungen einer Verletzung auf die Integrität der Myelinscheide.
Die elektronenmikroskopische Untersuchung der Myelinschädigung in Modellen einer Sehnervverletzung mit hoher Auflösung liefert entscheidende strukturelle Endpunkte für Studien zur frühen Neurodegeneration. Die quantitative Unterscheidung zwischen normalem und geschädigtem Myelin unterstützt die Aufklärung von Wirkmechanismen und hilft bei der Validierung von Zielstrukturen in der Wirkstoffforschung für das zentrale Nervensystem. Diese bildgebenden Ergebnisse ermöglichen fundierte Entscheidungen über die Weiterentwicklung in therapeutischen Ansätzen zum Neuroschutz und zur Remyelinisierung.
Dieser Workflow für die Elektronenmikroskopie ist in die Entwicklungs- bis präklinische Bandbreite von Programmen zur Verletzung und Reparatur des ZNS integriert.
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Ähnliche Videos
0 Aufrufe
Zuletzt aktualisiert: 29 August 2026