In vitro bakterielle Transinfektion von T-Zellen durch immunologische Synapsenbildung

Beginnen Sie mit Vertiefungen, die CD4⁺ T-Zellen enthalten, die Rezeptoren exprimieren, die spezifisch für das Ovoalbuminpeptid oder OVAp sind.

In die Vertiefung der Negativkontrolle wird eine poröse Membraneinlage eingesetzt.

Entnehmen Sie dendritische Zellen, die mit Bakterien infiziert und mit OVAp beladen sind, in einem Röhrchen zur Oberflächenpräsentation.

Dendritische Zellen werden direkt in die Testvertiefung und in den Einsatz in der Negativkontrollvertiefung gegeben.

Fügen Sie den Vertiefungen Medien hinzu und inkubieren Sie.

In der Testvertiefung interagieren die Zellen und bilden eine immunologische Synapse, die den bakteriellen Transfer von der dendritischen Zelle zur T-Zelle erleichtert, ein Prozess, der als Transinfektion bekannt ist.

In der Negativkontrollvertiefung verhindert die Membranbarriere die Zell-Zell-Interaktion und hemmt dadurch die Transinfektion.

Das Antibiotikum Gentamicin in die Vertiefungen geben und inkubieren.

Gentamicin kann nicht in eukaryotische Zellen eindringen, so dass nur nicht-internalisierte Bakterien abgetötet werden, während internalisierte Bakterien überleben.

Die Testprobe mit infizierten T-Zellen und die Kontrollprobe mit nicht infizierten T-Ze