Beurteilung der Transzytose von E. coli über intestinale Epithelmonoschichten
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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:28 Min. • September 26th, 2025
Beginnen Sie mit einer E. coli-Kultur , die aus Neugeborenen mit Blutbahninfektionen isoliert wurde.
Zentrifugieren Sie, um die Bakterien zu pelletieren, entsorgen Sie den Überstand und resuspendieren Sie das Pellet in einem antibiotikafreien Medium.
Nehmen Sie eine Platte mit einem Transwell-Einsatz, der eine Monoschicht der Darmepithelzellen enthält.
Messen Sie den elektrischen Widerstand über die Zellschicht mit einer Sonde, um die Integrität der Monoschicht zu bestätigen.
Geben Sie die Bakteriensuspension in die Einlage und inkubieren Sie.
Bakterien haften an Epithelzellen, werden in Vesikeln internalisiert und über einen Prozess namens Transzytose durch die Zellen in die untere Vertiefung transportiert.
Messen Sie den elektrischen Widerstand erneut; Ein stabiler Wert bestätigt eine intakte Monoschicht während der Transzytose.
Übertragen Sie den Einsatz in eine frische Vertiefung und sammeln Sie das Medium aus der vorherigen unteren Vertiefung.
Das gesammelte Medium auf eine Agarplatte legen und inkubieren, um die Bakterienkolonien zu entwickeln.
Zählen Sie die Kolonien, um das Ausmaß der E . coli-Transzytose über die Darmepithelbarriere zu bestimmen.
Füllen Sie alle 30 Minuten nach der
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