Messung der Wirkstoffbindung an Caseum aus Tuberkulose-Läsionen mit der Rapid Equilibrium-Dialysemethode

Nehmen Sie eine homogene Suspension von Caseum - dem nekrotischen, lipidreichen Material aus Tuberkuloseläsionen, das in seinem Kern arzneimitteltolerante Mykobakterien beherbergt.

Geben Sie das Testmedikament in das Homogenat und den Wirbel, um seine Wechselwirkung mit der Caseum-Matrix zu erleichtern.

Setzen Sie einen Schnellgleichgewichtsdialyseeinsatz mit Spender- und Empfängerkammern, die durch eine semipermeable Membran getrennt sind, in die Basisplatte ein.

Laden Sie das mit dem Wirkstoff versetzte Homogenat in die Donorkammer und fügen Sie der Empfängerkammer Puffer hinzu.

Verschließen Sie die Platte und inkubieren Sie sie mit Rotation.

Während der Inkubation diffundiert das freie Medikament über die Membran und erreicht ein Gleichgewicht zwischen beiden Kammern.

Sobald das Gleichgewicht erreicht ist, verdünnen Sie die Spenderprobe mit Puffer und die Empfängerprobe mit arzneimittelfreiem Homogenat, um die Matrixbedingungen für die Arzneimittelquantifizierung zu normalisieren.

Quantifizieren Sie abschließend die Wirkstoffkonzentration und berechnen Sie die ungebundene Wirkstofffraktion oder fu.

Der Fu spiegelt das freie Medikament wider, das zur Verfügung steht, um in das Caseum zu