Synchronisierung von Cyanobakterienkulturen und DNA-Verdichtung durch Hell-Dunkel-Zyklen

Beginnen Sie mit einer nährstoffreichen Agarplatte, die mit Thiosulfat ergänzt ist.

Streifen Sie die Cyanobakterien und inkubieren Sie unter abwechselnden Hell- und Dunkelperioden, um den zirkadianen Zyklus aufrechtzuerhalten.

Während der Lichtperiode unterstützen die Nährstoffaufnahme und Thiosulfat das Bakterienwachstum und die Kondensation der DNA.

In der Dunkelzeit sparen die Zellen Energie und teilen sich.

Der abwechselnde Hell-Dunkel-Zyklus synchronisiert die Zellen mit dem gleichen Wachstums- und Teilungsstadium.

Fügen Sie nach der Lichtperiode eine Saccharoselösung hinzu und pipettieren Sie wiederholt, um Cyanobakterien freizusetzen, die eine Farbveränderung verursachen. Übertragen Sie die Zellen in ein Röhrchen.

Fügen Sie einen DNA-spezifischen Fluoreszenzfarbstoff hinzu und inkubieren Sie im Dunkeln. Der Farbstoff bindet an die DNA der Cyanobakterien.

Zentrifugieren, um die Cyanobakterien abzutrennen und den Überstand zu entfernen.

Suspendieren Sie die Cyanobakterien in Saccharoselösung, geben Sie die Suspension auf einen Objektträger und decken Sie ihn ab.

Unter dem Fluoreszenzmikroskop bestätigt die blau kondensierte DNA in Zellen den synchronisierten, zirkadian regulierten Verl