Thermische Lyse-basierte genomische DNA-Extraktion aus einem pathogenen Bakterium

0 Aufrufe • 2:14 Min. • November 28th, 2025

Beginnen Sie mit Kolonien eines pathogenen Bakteriums, das auf einem nährstoffreichen Agarmedium gezüchtet wird.

Wählen Sie eine einzelne Kolonie, die eine genetisch homogene Population von Bakterienzellen gewährleistet und die Variabilität während der Genotypisierung reduziert.

Mit einer sterilen Inokulationsschleife wird die ausgewählte Kolonie in ultrareines Wasser übertragen, um das Risiko einer Einbringung von Schadstoffen in die Probe zu minimieren.

Wirbel die Suspension vor, um die Kolonie zu brechen und die Bakterienzellen gleichmäßig zu verteilen.

Anschließend wird die Suspension erhitzt, um die bakterielle Zellhülle zu stören, die aus der äußeren Membran, der Peptidoglykanschicht und der inneren Membran besteht.

Dies bewirkt, dass die bakteriellen Zellen lysieren und intrazelluläre Inhalte, einschließlich genomischer DNA, ins Wasser abgeben.

Zentrifugiere die Suspension mit hoher Geschwindigkeit, um Zellreste von der genomischen DNA zu trennen.

Übertragen Sie das Supernatant in ein frisches Rohr für die nachgelagerte Genotypisierung.

Zu Beginn verwenden Sie sterile Impfschleifen, um Yersinia ruckeri pure Kulturen auf jeder geeigneten Agarart auf Petrischalen auszusäen. Inkubieren

Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos

Anmelden

Weitere Videos entdecken

Yersinia ruckeri