Ein auf Flüssigkeitschromatographie basierender Massenspektrometrie-basierter Ansatz zur Analyse von Metaboliten von S. aureus
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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:23 Min. • November 28th, 2025
Beginnen Sie mit Staphylococcus aureus , die in einer Abschrecklösung mit Siliziumperlen suspendiert ist und bei niedriger Temperatur gelagert wird, um seinen Stoffwechselzustand zu erhalten.
Homogenisierung der Bakterien unter kalten Bedingungen, um intrazelluläre Inhalte freizusetzen und gleichzeitig den enzymatischen Abbau der Metaboliten zu minimieren.
Zentrifugieren Sie das Lysat und entnehmen Sie den metabolitreichen Supernatanten.
Fügen Sie dem Extrakt ein organisches Lösungsmittel hinzu und wirbeln, um Makromoleküle aus löslichen Metaboliten auszufällen.
Zentrifugieren, um den Niederschlag zu pelletieren und den Supernatant in Phiolen zu übertragen.
Laden Sie die Fläschchen in ein Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie-System.
Innerhalb der Chromatographiesäule interagieren Metaboliten mit der festen stationären Phase basierend auf ihren chemischen Eigenschaften.
Fügen Sie einen Puffer hinzu, um die Metaboliten zu elutieren. Dann werden die Metaboliten in die Elektrospray-Ionisationsquelle des Massenspektrometers geleitet, um sie zu ionisieren.
Die Ionen werden dann anhand ihres Masse-Ladungs-Verhältnisses getrennt.
Die resultierenden Daten werden mit einer Referenzdatenban
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