Echtzeitbildgebung bakterieller Infektionen in einem Mausmodell mittels Biolumineszenz

Nehmen wir eine narkosierte Maus, die mit einem pathogenen Bakterienstamm vorinfiziert ist, der so konstruiert ist, dass er ein genetisch integriertes Biolumineszenz-Operon exprimiert.

Das Operon codiert Luciferase und einen Multienzymkomplex, der sein Substrat synthetisiert.

Das Luciferase-Enzym katalysiert eine Reaktion mit diesen Substraten und erzeugt sichtbare Lumineszenz.

Stellen Sie die Maus in Rückenlage auf die temperaturstabilisierte Plattform einer Bildkammer und halten Sie während der Bildgebung die Anästhesie aufrecht.

Verwenden Sie das Bildgebungssystem, um sowohl biolumineszente als auch entsprechende Röntgenaufnahmen der Maus aufzunehmen.

Das biolumineszente Bild zeigt das Ausmaß der bakteriellen Infektion, während das Röntgenbild eine anatomische Referenz für die Infektionslokalisierung bietet.

Nach der Bildgebung bringen Sie die Maus zurück in ihren Käfig und lassen Sie sich erholen.

Biolumineszenzbilder in regelmäßigen Abständen aufnehmen, um den Echtzeitverlauf der bakteriellen Infektion zu überwachen.

Im Laufe der Zeit bestätigt das Vorhandensein von biolumineszenten Signalen an verschiedenen Orten die Ausbreitung der Infektion im gesamten Wirt.

Um die Tiere zu fotografieren, bereiten Sie das Bildgebungssystem vor, indem Sie die Kameraparameter einstellen und die Bühne erhitzen. Stellen Sie den Sauerstofffluss auf 1,5 Liter pro Minute und Isofluran auf 3,5 % ein und bringen Sie die Maus in die Anästhesiekammer, dann in die temperaturstabilisierte Stufe nach der Anästhesie. Positioniere die Maus auf dem Rücken mit ausgestreckten Armen und passe eine Nasenkegel an, um während der Bildgebenden 2,5 % Isofluran zu verabreichen.

Schließen Sie die Tür und machen Sie biolumineszente Bilder und Röntgenaufnahmen der Maus. Nach Abschluss der Bildgebung bringen Sie die Maus zurück in ihren Käfig und überwachen Sie sie. Er sollte innerhalb von 3 bis 5 Minuten wieder zu Bewusstsein kommen.