Name: Generierung von neuralen Stammzellen aus menschlichen Föten Ausrangierte Rindengewebe (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Lernen Sie die Isolierung und Kultivierung neuraler Stammzellen aus menschlichem fötalem Kortexgewebe. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung pathologischer Prozesse und die Bewertung pharmakologischer Wirksamkeit.

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HD054347 und NS063997-01 bis VLS: Diese Arbeit wurde zum Teil durch die National Institutes of Health unterstützt. Diese Arbeit wurde zum Teil auch durch den Empire State Stem Cell Fonds durch die New York State Department of Health Contract # C024324 zu VLS unterstützt. Die darin geäusserten Meinungen sind hier ausschließlich die des Autors und spiegeln nicht unbedingt die des Empire State Stem Cell Board, das New York State Department of Health, oder des Staates New York. VLS ist ein Doris Duke Clinical Scientist Developmental Preisträgerin. Wir danken auch Professor Timothy Vartanian für seine Gabe der Anti-O1, Anti-O4-Antikörper.

1. Herstellung von Lösungen und Materialien für die Präparation und Pflege von neuralen Stammzellen Kultur <ol><li> Bereiten 100ml Dissektion Medium (KNOCKOUT DMEM/F12, Invitogen) vor der Zeit und in den Kühlschrank. </li><li> Prepare100 ml Kulturmedium (Stem Pro NSC SFM, Invitrogen) und halten bei 37 ° C in einem Wasserbad. </li><li> Bereiten Zell-Einfriermedium (KNOCKOUT DMEM/F12 +10% FBS + 5% DMSO) für die langfristige Kryokonservierung von Zellen. </li><li> Wenn gewünscht, bereiten 4% Paraformaldehyd (PFA) für Gewebefixierung. </li><li> Sterile, autoklaviert Pinzette und Skalpell Klingen mit Griffe sind für die Präparation verwendet. </li><li> Beiseite einer Pipette Pistole, 10 ml Transferpipetten und 40 uM Zellsieb (BD Falcon 352340) für Dissoziation. </li><li> Beiseite mehrere 10 cm Kulturschalen (BD) für die Präparation, 50 ml Zentrifugenröhrchen (BD) für die Dissoziation, 1,5 ml Röhrchen für die Gewebe-Lagerung und gefrorene Röhrchen (BD) für das Einfrieren von Zellen. </li></ol> 2. Isolierung humaner neuraler Stammzellen aus dem menschlichen fetalen Gehirns <ol><li> Die Ernte der lebensfähiges Gewebe sofort nach Beendigung des Fötus ist entscheidend für den Erfolg des Verfahrens. Für elektive Prozeduren können Timing, um Proben zu erhalten im Voraus gebucht werden, um so Zeit nach fetalen Tod zu minimieren. Die Produkte der Empfängnis sind innerhalb von 2 Stunden nach dem Eingriff geerntet, sondern im Idealfall auf elektiven Eingriffen innerhalb weniger Minuten erreicht werden. Die fetalen Gewebe oft fragmentiert sind. Im allgemeinen sind jedoch ein wesentlicher Teil des Gehirns bleibt für visuelle Identifizierung. Einschränkungen von Gestationsalter (GA) werden von gesetzlichen Vorschriften bestimmt, sondern wurden unter Verwendung dieses Protokolls zwischen 18-22 Wochen GA. </li><li> Fetal Gehirn ist in einer 10 ml Petrischale mit eiskaltem KNOCKOUT DMEM/F12 Lösung gegeben. Identifizieren verschiedenen Teilen des Kortex von anatomischen Landmarken. Grenzen für die Frontal-und parieto-occipital Kortex richtet sich nach den hochgerechneten Schnittpunkt der zentralen Sulcus und Sylvi-Fissur. Dissect Gewebe aus dem frontalen Kortex anterior des Sulcus centralis und entlang der Grenze von der Sylvi-Fissur mit chirurgische Messer, achten Sie darauf, halten den Ventrikel intakt und unbeschädigt sein. </li><li> Entfernen Sie alle verbleibenden Blut und Meningen aus dem abgetrennten Block von frontalen Kortex. Wenn die Probe von ausreichender Qualität, ist es ideal, um den Block in mehrere kleinere Proben für verschiedene Zwecke zu sezieren: Sektionen (in 4% Paraformaldehyd, PFA) und Protein / mRNA-Assays (schnell in -80 ° C gefroren). </li><li> Übertragen Sie die ausgewählten Gehirn blockieren, um ein 50 ml Zentrifugenröhrchen, und fügen Sie eiskalten KNOCKOUT DMEM/F12 Lösung bei etwa 3-mal des Gewebes der Lautstärke. Vorsichtig distanzieren das Gewebe durch mechanische Pipettieren mit einer 10 ml Vollpipette, bis alle Gewebe fragmentiert wird (in der Regel 20-30 mal) und dann filtern Sie die Zellen durch eine 40 uM Zellsieb (BD Falcon 352340) um Einzel-oder in der Nähe einzelnen Zelle zu erhalten Suspension. </li><li> Centrifuge die Zellsuspension bei 2000 rpm und Raumtemperatur für 5 min, Zellpellet in 10 ml frisches, warmes Kulturmedium (Stem Pro NSC SFM), und zählen Sie die Anzahl der Zellen mit einer Zählkammer. </li><li> 5 ml warmem Kulturmedium in je 25 cm 2 Kulturflaschen und Transfer 2x10 6 Zellen in jeden Kolben. Kulturen sind in einem 37 ° C / 5% CO 2-Inkubator für 1 Woche vor der Analyse. Ändern Sie die Hälfte des Mediums einmal pro Woche für weitere Kulturen oder Experimente. </li></ol> 3. Manipulaton neuraler Stammzellen für die weitere Charakterisierung oder Experimente <ol><li> Neurosphären in der Regel in 1 bis 2 Wochen bilden unter den empfohlenen Kulturbedingungen mit NSC Durchmesser im Bereich zwischen 200 und 400 um. Neurosphären in diesem Stadium kann mit 0,2 g / L EDTA in Calcium-und Magnesium freie Hanks Medium (Hanks) bei 37 ° C dissoziiert für 15 min auf einzelne Zellen zu erhalten. Cells Suspension bei 2000 rpm, in frischen Hanks gespült gesponnen, und replattiert in warmen Nährboden für Subkultur. </li><li> Zur Einleitung Differenzierung werden dissoziierten Zellen auf poly-D-lysine/laminin 1 beschichtete Deckgläser in einer Dichte von 1x10 5 Zellen pro Deckglas (24mmX24mm) ausplattiert. Oligodendrozyten-Differenzierung wird durch die Aufrechterhaltung der Zellen in KNOCKOUT DMEM/F12 (Invitrogen, Main, MD) +2% B27 (50X, Invitrogen, Main, MD) +10 ng / ml bFGF 100 ng / ml SHH + 10ng/ml PDGF-AA für erreicht 2 Tage, dann Umstellung auf das gleiche Medium ohne Wachstumsfaktoren für weitere 5 Tage. Neuronale Differenzierung wird durch das Aufrechterhalten Zellen in KNOCKOUT DMEM/F12 +2% B27 (50x) für 7 Tage erreicht. Astrocyte Differenzierung wird durch Kultivieren von Zellen in KNOCKOUT DMEM/F12 +1% FBS für eine Woche getan. </li><li> Die Transfektion von neuronalen Stammzellen mit Gene können mit dissoziierten Zellen aus dem vorgeformten Neurosphären durchgeführt werden. Hier haben wir gezeigt, dass die Stammzellen mit EGFP-C1 durch Elektroporation transfiziert. Die Elektroporation von EGFP-C1-Konstrukt wurde unter Verwendung von amaxa Nucleofector Kits für Mouse Neural Stem Cells (VPG-1004) mit amaxa Nucleofector Device (Lonza AAD-1001), nachdem das Unternehmen die Anweisung. Kurz gesagt, wurden 5 ug DNA mit 1 x 10 6 Zellen mit 100 ul Transfektion Medium gemischt und nach Puls Elektroporation wurden die Zellen in der neuralen Stammzellen erhalten Medium für weitere Kultur resuspendiert. Die Differenzierung der transfizierten Zellen wurden mit der Dissoziation von Neurosphären 3-4 Tage nach der Elektroporation verarbeitet, nach dem gleichen Verfahren in Schritt 3.2 beschrieben. </li></ol> 4. Freezing neuralen Stammzellen und Subkulturen <ol><li> Dissoziiert Zellsuspensionen werden zentrifugiert und in Einfriermedium mit einer Konzentration von 1x10 7 Zellen / Flasche / ml. Langsam frieren die Zellen in -20 ° C, -80 ° C dann in flüssigen Stickstoff Transfer für lange Lagerung. </li><li> Die Zellen werden schnell mit 37 ° C aufgetaut Wasserbad gewaschen und in erwärmt DMEM/F12 +10% Serum für eine Wäsche, zentrifugiert, um das Einfrieren Medium zu entfernen, und erneut in die erwärmte Kulturmedium. </li></ol> 5. Repräsentative Ergebnisse: Neurale Stammzellen von einem normalen Fötus mit 18 Wochen Schwangerschaftsdauer wurden nach dem beschriebenen Verfahren und Neurosphären nach einer Woche mit runden, glatten Rändern und ziemlich homogen Größe (Abb. 2a) zu sehen ist, kultiviert. Diese Neurosphären mit EGFP-C1 oder anderen Konstrukten transfiziert und anschließend unter Fluoreszenz-Mikroskopie (Abb.2b,). Gegründet Neurosphären wurden dann dissoziiert mit EDTA und verchromt als dispergierte Zellen auf beschichteten Deckgläsern. Zellen, die unter den jeweiligen Protokollen unterschieden wurden mit 4% parafamaldehyde fixiert und gefärbt mit verschiedenen Zelltyp spezifischen Markern. Multipotentiality ist mit der Expression von Markern bezeichnend für Neuronen (Fig2C, D, Rhodamin) Astrozyten (Fig2E, F, Rhodamin) und Oligodendrozyten (Fig2G, H, Rhodamin) beobachtet. Die Zellen nicht erworben Elektroporation von EGFP wurden auch in verschiedenen Zelltypen differenzieren und gefärbt mit verschiedenen Zell-spezifische Marker. Multipotentiality ist mit der Expression von Markern bezeichnend für Neuronen (Fig3A, B, Fluorescein) Astrozyten (Fig3C, Rhodamin und Fig3D, Fluorescein) und Oligodendrozyten (Fig3E, F, Rhodamin) beobachtet. <img src="/files/ftp_upload/2681/2681fig1.jpg" alt="Abbildung 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Abbildung 1"> Abbildung 1. Schematische Darstellung des experimentellen Verfahren zur neuralen Stammzellen aus gebrauchten menschlichen fetalen Gehirns zu isolieren <img src="/files/ftp_upload/2681/2681fig2.jpg" alt="Abbildung 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Abbildung 2"> Abbildung 2. Undifferenzierte und differenzierte menschliche Nervenzellen in vitro propagiert. (A) Neurosphären unter Phasenkontrast-Mikroskopie gezeigt demonstrieren glatte, runde Grenzen und schnelles Wachstum nach der Kultur seit über 1 Woche. (B) Einführung der verschiedenen Plasmide und Konstrukte können durch Transfektion erreicht werden. Drei Tage nach der EGFP-C1-Transfektion, zeigen mehrere Zellen die Expression des grün fluoreszierenden Proteins, wie unter Fluorescein Immunfärbung und Fluoreszenzmikroskopie zu sehen. EGFP-C1 transfizierten Neurosphären werden dissoziiert und differenziert unter verschiedenen Bedingungen zu Neuronen (C, D), Astrozyten (E, F) und Oligodendrozyten (G, H) und sehen unter Rhodaminfluoreszenz. Gleichzeitig sind transfizierten EGFP-positiven Zellen unter Fluorescein-Fluoreszenz gezeigt. Transfizierten Zellen (weiße Pfeilspitzen) sind zu unterscheiden von nicht transfizierten Zellen (weiße Pfeile). Die Zellkerne sind mit Hoechst33342 gefärbt. Scale-Bars sind 200 pm für A, 100 pm für B und 25 um für CH. <img src="/files/ftp_upload/2681/2681fig3.jpg" alt="Abbildung 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Abbildung 3"> Abbildung 3. Neurosphären ohne Transfektion sind dissoziiert und differenziert unter verschiedenen Bedingungen in Neuronen (A, B, Fluorescein), Astrozyten (C, Rhodamin, D, Fluorescein) und Oligodendrozyten (E, F, Rhodamin). Die Zellkerne sind mit Hoechst33342 gefärbt. Scale-Bars sind 25 mu m für AF.

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</ol>

Es gibt verschiedene Ansätze zur Kultur frischem Gewebe und Herstellung von menschlichen Zelllinien. Historisch gesehen hat frischem Gewebe geerntet und sofort in verschiedenen Zelltypen im zentralen Nervensystem zu erzeugen kultiviert. Dieser Ansatz ist jedoch klar durch die Anzahl der Proben, die erhalten-die im Falle der menschlichen Proben, ist in der Regel recht klein werden kann, begrenzt. Angesichts der minimalen Grad an Manipulation, bieten frisch gezüchteten Nervenzellen den zuverlässigsten experimentelles Syst...

<table border="1"><tbody><tr><th> Name des Reagenzes </th><th> Firma </th><th> Katalog-Nummer </th><th> Kommentare (optional) </th></tr><tr><td> KNOCKOUT DMEM/F12 </td><td> Invitrogen </td><td> 12660-012 </td><td> Dissoziation Medium </td></tr><tr><td> Stem Pro NSC SFM </td><td> Invitrogen </td><td> A10509-01 </td><td> Nährboden </td></tr><tr><td> Fetal Bovine Serum </td><td> Invitrogen </td><td> 10091-148 </td><td> Gefrorenes Medium </td></tr><tr><td> Hanks-Lösung (-Ca 2 +,-Mg 2 +) </td><td> Invitrogen </td><td> 14175-095 </td><td> Dissoziation Medium </td></tr><tr><td> DMSO </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D2650 </td><td> Gefrorenes Medium </td></tr><tr><td> EDTA </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 431788 </td><td> Dissoziation Medium </td></tr><tr><td> Paraformaldehyd </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 158127 </td><td> Fixation Lösung </td></tr><tr><td> bFGF </td><td> R &amp; D </td><td> 234-FSE </td><td> Differenzierungsmedium </td></tr><tr><td> SHH </td><td> R &amp; D </td><td> 1845-SH </td><td> Differenzierungsmedium </td></tr><tr><td> PDGF-AA </td><td> R &amp; D </td><td> 221-AA </td><td> Differenzierungsmedium </td></tr><tr><td> B27 </td><td> Invitrogen </td><td> 17504-044 </td><td> Differenzierungsmedium </td></tr><tr><td> Maus Anti-MAP2 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M2320 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> Kaninchen Anti-DCX </td><td> Zelluläre Signale </td><td> 4604s </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> Kaninchen Anti-GFAP </td><td> DAKO </td><td> Z0334 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> Kaninchen Anti-S100B </td><td> DAKO </td><td> Z0311 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> Kaninchen Anti-O1 </td><td> Geschenke von Professor Timothy Vartanian * </td><td></td><td> 01.50 </td></tr><tr><td> Kaninchen Anti-O4 </td><td> Geschenke von Professor Timothy Vartanian * </td><td></td><td> 01.50 </td></tr><tr><td> 40 um Zellsieb </td><td> BD Falcon </td><td> 352340 </td><td></td></tr></tbody></table> * Timothy Vartanian, MD, PhD, Department of Neurology and Neuroscience, Weill Cornell Medical College, New York, USA

generierung von neuralen stammzellen aus menschlichen föten ausrangierte rindengewebe

Generation of Neural Stem Cells from Discarded Human Fetal Cortical Tissue

Neurale Stammzellen (NSCs) entlang der ventrikulären Zone Neuroepithel wohnen während der Entwicklung der kortikalen Platte. Diese frühen Vorfahren die zu weiteren Zwischen-Vorläuferzellen und später die verschiedenen neuronalen und glialen Zell-Subtypen, dass die Großhirnrinde bilden. Die Fähigkeit, zu generieren und zu erweitern menschlichen NSCs (sog. Neurosphären) aus gebrauchten normalen fetalen Gewebe bietet ein Mittel, mit denen direkt zu untersuchen, um die funktionalen Aspekte der normalen menschlichen NSC Entwicklung 1-5. Dieser Ansatz kann auch auf die Generation der NSCs aus bekannten neurologischen Erkrankungen gerichtet sein, wodurch sich die Möglichkeit, Krankheitsprozesse, die Vorläuferzellen Proliferation, Migration und Differenzierung 6-9 verändern zu identifizieren. Wir haben auf die Identifizierung pathologischer Mechanismen im menschlichen Down-Syndrom NSCs, die zur beschleunigten Alzheimer-Phänotyp 10,11 beitragen könnten konzentriert. Weder in vivo noch in vitro-Maus-Modelle replizieren kann die gleiche Repertoire von Genen auf dem menschlichen Chromosom 21 befindet. Hier verwenden wir eine einfache und zuverlässige Methode zur Isolierung Down-Syndrom NSCs aus abgetriebenen menschlichen Föten Kortex und wachsen sie in der Kultur. Die Methodik bietet spezifische Aspekte der Ernte der Gewebe, Dissektion mit begrenzten anatomischen Landmarken, Zellsortierung, Beschichtungs-und Passagieren des menschlichen NSCs. Wir bieten auch einige grundlegende Protokolle zur Induktion Differenzierung von humanen NSCs in selektiver Zell-Subtypen.

Eine einfache und zuverlässige Methode zur Isolierung und Kultivierung von neuralen Stammzellen aus gebrauchten menschlichen fetalen kortikalen Gewebe wird beschrieben. Kulturen von bekannten menschlichen neurologischen Erkrankungen abgeleitet werden können für die Charakterisierung von pathologischen zellulären und molekularen Prozesse eingesetzt werden, sowie eine Plattform bieten, um pharmakologische Wirksamkeit zu beurteilen.

Generierung von neuralen Stammzellen aus menschlichen Föten Ausrangierte Rindengewebe

Neurale Stammzellen (NSCs) befinden sich während der Entwicklung der Kortikalisplatte entlang des Neuroepithels der Ventrikularzone. Diese frühen Progenitorzellen ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, humane neurale Stammzellen aus verworfenem frontalem kortikalem Gewebe zu isolieren. Dies wird erreicht, indem zunächst die Lösungen und Materialien im Voraus vorbereitet werden, bevor humane fetale Gehirne disseziert werden. Anschließend folgt die Kultivierung der isolierten neuronalen Stammzellen, einschließlich weiterer Expansion, Charakterisierung und Experimentierung. Die Langzeitlagerung ist ebenso möglich wie die Anlage von Unter­kulturen zur Differenzierung von Vorläuferzellen in neuronale und gliale Zelltypen. Letztendlich kann die Differenzierung von Zellen aus normalem ZNS charakterisiert und mit der von Zellen aus ZNS-Gewebe mit bekannten neurologischen Erkrankungen verglichen werden. Die Bedeutung dieser Technik reicht bis hin zur Therapie oder Diagnose jeglicher menschlicher ZNS-Erkrankungen.Die Technik bietet eine einfache und zuverlässige Plattform zur Beurteilung pathologischer S und zur Bewertung der pharmakologischen Wirksamkeit neuer Wirkstoffe bei einer gegebenen Erkrankung. Aufgrund des außergewöhnlichen Werts von multipotenten Zellen müssen alle Materialien vor Beginn des Protokolls bereitstehen. Um das

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Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Wir haben ein Protokoll zur Induktion von Neuroblasten direkt von pluripotenten humanen embryonalen Stammzellen unter bestimmten Bedingungen mit kleinen Molekülen, die Ableitung von einem großen Angebot an humanen neuronalen Vorläuferzellen und neuronalen Zelltypen in sich entwickelnden ZNS für neuronale Reparatur ermöglicht gepflegt eingerichtet.

Effiziente Ableitung von humanen neuronalen Vorläuferzellen und Neuronen aus pluripotenten humanen embryonalen Stammzellen mit Small Molecule Induction

Dieses Video demonstriert die Methode zur Unterscheidung menschlicher neuraler Stammzellen aus Neurosphären in neuronale und Astrozyten-Vorläuferzellen durch enzymatische Behandlung und Kultivierung in einem wachstumsfaktorreichen Medium, was schließlich zur Reifung zu spezialisierten Vorläuferzellen führt.

Differenzierung humaner neuraler Stammzellen in neurale und Astrozyten-Vorläuferzellen

Dieses Video beschreibt eine Methode zur Herstellung von Glasdeckgläsern, die mit Polyornithin und Laminin beschichtet sind, um die Adhäsion und das Wachstum von neuralen Stammzellen zu verbessern. Die Technik beinhaltet sequentielle Inkubationen und Waschungen, die die Bildung einer unterstützenden Matrix erleichtern, die das Wachstum und die Differenzierung der neuronalen Zellen fördert und die in den Neuronen gefundenen Strukturen nachahmt.

Generierung kortikaler Pyramidenneuronen aus humanen neuralen Stammzellen

Neuronale Stammzellen aus dem erwachsenen Gehirn geerntet steigen in Anwendungen, die von der Grundlagenforschung der Entwicklung des Nervensystems zu erforschen mögliche klinische Anwendungen in der regenerativen Medizin eingesetzt. Dies macht eine strenge Kontrolle bei der Isolierung und Kultivierungsbedingungen verwendet werden, um diese Zellen entscheidend für experimentelle Ergebnisse klingen wachsen.

Wachsende neuronale Stammzellen aus konventionellen und Nonconventional Regionen der Volks Nagetier Gehirn

Dieses Protokoll beschreibt einen neuartigen mechanischen Schneideverfahren, das die Erweiterung der sphärischen neuralen Stamm-und Vorläuferzellaggregate ohne Dissoziation zu einer Einzelzellsuspension ermöglicht. Die Aufrechterhaltung Zell / Zell-Kontakt ermöglicht eine schnelle und stabile Wachstum seit über 40 Passagen.

Ein cGMP-Verfahren zur Erweiterung anwendbar Aggregate von humanen neuralen Stamm-und Vorläuferzellen, abgeleitet von pluripotenten Stammzellen oder fetalen Hirngewebe

Es wurde eine Methode entwickelt, um direkt abzuleiten humanen neuralen Stammzellen aus hämatopoetischen Vorläuferzellen aus peripherem Blut Zellen angereichert.

Direkte Induktion von humanen neuralen Stammzellen aus peripherem Blut hämatopoetischen Vorläuferzellen

Das Rückenmark eines adulten Säugetieres enthält neurale Stamm-/Vorläuferzellen (NSPCs), die in Kultur isoliert und erweitert werden können. Dieses Protokoll beschreibt die Entnahme, Isolierung, Kultivierung und Passage von NSPCs, die aus der periventrikulären Region des adulten Rückenmarks von der Ratte und von menschlichen Organtransplantatspendern erzeugt wurden.

Isolierung von Neural Stamm- / Vorläuferzellen aus dem Periventrikuläre Region der erwachsenen Ratte und Human Spinal Cord

Erzeugung von induzierten pluripotenten Stammzellen bietet faszinierende Perspektiven für die Ableitung von autologen Transplantaten. Allerdings Progression durch einem pluripotenten Zustand und mühsame Wieder Differenzierung noch behindert klinischen Übersetzung. Hier beschreiben wir die Ableitung der erwachsenen menschlichen Fibroblasten und deren direkte Umsetzung in induzierten neuronalen Vorläuferzellen und die nachfolgende Differenzierung in neuronale Abstammungen.

Ableitung von Adult menschlichen Fibroblasten und deren direkte Umwandlung in Erweiterbar neuronalen Vorläuferzellen

Hier stellen wir eine neuartige mikrochirurgische Technik für die Isolierung von neuralen Stammzellen aus E13 Maus Embryo ganglionic Eminenz.

Isolation und Kultur der embryonalen Maus neurale Stammzellen

Das Protokoll stellt die Reprogrammierung von peripheren mononukleären Blutzellen vor, um neuronale Stammzellen durch Sendai-Virusinfektion zu induzieren, Differenzierung von iNSCs in dopaminerge Neuronen, Transplantation von DA-Vorstufen in die einseitig Parkinson-Mausmodelle und Bewertung der Sicherheit und Wirksamkeit von iNSC-abgeleiteten DA-Vorstufen für die PD-Behandlung.

Generierung induzierter neuronaler Stammzellen aus peripheren mononukleären Zellen und Differenzierung zu dopaminergen Neuronenvorstufen für Transplantationsstudien

Wir stellen eine gentechnisch veränderte (GV-freie) Methode vor, um Zellen mit einem neuronalen Phänotyp aus reprogrammierten peripheren Blutzellen zu gewinnen. Die Aktivierung eines Signalwegs, der mit einem neuartigen menschlichen GPI-verknüpften Protein verbunden ist, zeigt eine effiziente GENV-freie Methode zur Gewinnung menschlicher pluripotenter Stammzellen.

GEN-freie Erzeugung von blutabgeleiteten neuronalen Zellen

Lernen Sie die Isolierung und Kultivierung neuraler Stammzellen aus menschlichem fötalem Kortexgewebe. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung pathologischer Prozesse und die Bewertung pharmakologischer Wirksamkeit.

Generierung von neuralen Stammzellen aus menschlichen Föten Ausrangierte Rindengewebe

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