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DOI: 10.3791/2771-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Sicheres Arbeiten und menschlich mit Forschung Nager erfordert eine Kernkompetenz in der Handhabung und Zurückhaltung Methoden. Dieser Artikel wird die grundlegenden Prinzipien erforderlich, um sicher zu handhaben und effektiv zu verwalten Verbindungen an Mäusen und Ratten.
Das übergeordnete Ziel des folgenden Videos ist es, den Betrachter mit verschiedenen Techniken vertraut zu machen, die zur manuellen Fixierung und Verabreichung von Verbindungen bei Mäusen und Ratten verwendet werden. Mäuse und Ratten können durch eine Reihe von ein- oder zweihändigen Techniken oder unter Verwendung von plastischen Fesseln Techniken zur Verabreichung von Verbindungen fixiert werden, wie intraperitoneal, subkutan, intravaskulär und intradermal. In diesem Video werden die Injektionsmethoden sowie die orale Sonde und die intranasale Verabreichung demonstriert.
Zu lernen, wie man souverän, schonend und sicher mit Tieren umgeht, ist ein wichtiger Bestandteil der In-vivo-Forschung. Tiere sollten immer so behandelt werden, dass sie sowohl für das Tier als auch für den Forscher sicher sind. Im Allgemeinen können Menschen, die mit diesen Methoden noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da es einige Zeit dauert, bis sie sich an die Arbeit mit Nagetieren gewöhnt haben.
Nagetiere können auch Menschen einschüchtern oder erschrecken, die neu in der Arbeit mit ihnen sind. Die visuelle Demonstration der Dosisverabreichungs- und Fixierungstechniken ist sowohl für die erfolgreiche Verabreichung des Wirkstoffs als auch zur Vermeidung von Stress oder Verletzungen des Tieres und des Fixierers von entscheidender Bedeutung. Mäuse können manuell mit einer ein- oder zweihändigen Technik gefesselt werden.
Der erste Schritt beider Methoden besteht darin, die Maus vorsichtig an der Basis des Schwanzes auf den Käfigdeckel, die Drahtgitterkäfigspitze oder eine ähnliche raue Oberfläche zu heben. Für die einhändige Technik steckst du den Ansatz des Schwanzes zwischen den dritten und vierten Finger, während du den Schwanz sanft nach hinten ziehst. Dies führt dazu, dass die Maus die Oberfläche greift und nach vorne zieht.
Als nächstes fest. Fassen Sie die Maus am Schopf mit der gleichen Hand, die den Schwanz hält. Fassen Sie mit dem Zeigefinger und Daumen in der Nähe der Basis des Kopfes und verlängern Sie den Griff nach hinten, indem Sie den Mittel- und Ringfinger einbeziehen.
Achten Sie darauf, gerade genug Druck auf die Haut um den Hals auszuüben, um zu verhindern, dass sich die Maus dreht oder verdreht, aber nicht so sehr, dass das Tier nicht atmen kann. Die beidhändige Technik ist ähnlich, nur dass eine Hand den Schwanz sanft zurückzieht, während die andere Hand die Maus schnell und fest am Nacken packt, wobei der Schwanz in der einen und der Schopf in der anderen Hand gehalten wird. Hebe die Maus an und stecke die Basis des Schwanzes zwischen die Handfläche und den dritten oder vierten Finger der Hand, die das Genick hält.
Achten Sie wie zuvor darauf, dass der Griff fest sitzt, das Tier aber noch atmen kann. Rattengemurmel wird in der Regel beidhändig durchgeführt. Nehmen Sie zuerst die Ratte aus ihrem Käfig und setzen Sie sie auf eine raue Oberfläche.
Fassen Sie dann die Ratte mit der nicht dominanten Hand am Schwanz und ziehen Sie. Halten Sie den Schwanz sanft nach hinten in einer Hand und nähern Sie sich mit der anderen von hinten dem Genick der Ratte. Üben Sie sanften Druck auf den Rücken der Ratte aus, während Sie sich zu den Schulterblättern bewegen.
Und schließlich das Genick zwischen den Fingern und der Handfläche greifen. Ratten können Laute ausstoßen, wenn sie auf diese Weise zurückgehalten werden. Wenn Sie einen Griff über die Schulter verwenden, fassen Sie die Ratte mit der dominanten Hand am Schwanz und ziehen Sie sie sanft nach hinten.
Legen Sie dann die nicht-dominante Hand auf den Rücken der Ratte, die sich von hinten nähert. Fassen Sie die Ratte mit dem Ringfinger, dem kleinen Finger und dem Daumen um den Brustkorb. Der Kopf der Ratte sollte sich zwischen Zeige- und Mittelfinger befinden.
Eine weitere Methode der Fixierung ist der Griff unter den Schultern. Fassen Sie den Schwanz mit der dominanten Hand wie zuvor gesehen und legen Sie die nicht dominante Hand über den Rücken der Ratte, die sich von hinten nähert. Fassen Sie als Nächstes die Ratte um den Brustkorb direkt unter den Schulterblättern.
Die Unterarme der Ratte sollten mit Daumen und Zeigefinger sanft nach oben gedrückt werden. Die Unterarme sollten sich unter dem Kinn der Ratte kreuzen, damit sie nicht beißt. Die Ratte kann auf diese Weise mit einer Hand gehalten werden, wenn der Körper gegen den Hundeführer stabilisiert ist.
Ein flexibles, kegelförmiges Stück aus dünnem Kunststoff, das als De-Capic-Kegel bezeichnet wird, kann auch zur Fixierung verwendet werden. Schieben Sie das Tier nach vorne, bis seine Nase aus dem Loch am Ende des Capone herausragt, halten Sie den Beutel entweder geschlossen um den Schwanz oder verwenden Sie ein Gummiband oder einen Kabelbinder, um das Tier an Ort und Stelle zu sichern. Sobald fixierte Injektionen durch das Kunststoffmaterial verabreicht werden können, ist ein starrer Kunststoffbehälter nützlich, wenn Zugang zum Schwanz benötigt wird.
Setzen Sie die Ratte wie vom Hersteller des Gerätes beschrieben ein. Bei dieser Art der Fixierung wird die Ratte durch den Schwanz sanft nach hinten in die Fixierung gezogen. Platzieren Sie den Verschluss an der Vorderseite des Geräts und stellen Sie ihn so ein, dass die Bewegungen des Tieres begrenzt werden.
Wenn Tiere aufgeregt zu sein scheinen, kann ein Handtuch zurückgehalten werden, wenn es über das Tier gelegt wird, die Dunkelheit und sanfte Fesselung durch das Handtuch kann eine widerspenstige Ratte beruhigen. Lege das Handtuch vorsichtig über die Ratte und greife sie dann vorsichtig um den Körper. Wickeln Sie das Handtuch um die Ratte und achten Sie darauf, dass es nicht an die Nase der Ratte gelangt.
Bewegen Sie das Handtuch so, dass der Körperteil für die Injektion freiliegt. Bevor Sie eine der folgenden Verabreichungstechniken durchführen, ist es von Vorteil, den Umgang mit der Spritze zu üben. Im Idealfall manipuliert eine Hand die Spritze, während die andere die Tiernadeln festhält. Die Nadeln werden am besten mit dem Schrägen nach oben in das Tier eingeführt, insbesondere bei intravenösen Injektionen.
Feinnadeln können leicht beschädigt werden, wenn sie in Fläschchenstopfen eingeführt werden. Verwenden Sie ein größeres Messgerät, um Materialien zu entnehmen, und ersetzen Sie es dann durch ein kleineres Messgerät für die Injektion. Die intranasale Verabreichung wird bei einigen Arten von Infektionserregern bei Allergien und Asthma sowie in einigen Studien mit der Lunge angewendet.
Die intranasale Verabreichung erfordert keine Anästhesie und keine Operation als intratracheale Installation. Würde für die intranasale Verabreichung das Tier wie zuvor beschrieben fixiert werden, wird mit einer Spritze oder Pipette eine kleine Menge des einzuatmenden Materials an die Nasenlöcher des Tieres gelegt. Achten Sie darauf, dass das Material in den Nasenlöchern verschwindet, und wiederholen Sie es bei Bedarf.
Verbindungen werden intramuskulär verabreicht, wenn sie eine schnelle Aufnahme erfordern, und können in sehr kleinen Mengen verabreicht werden. Die Fixierung für intramuskuläre Injektionen kann zwei Personen in Anspruch nehmen, da ein Hinterbein für die Injektion frei und stabilisiert sein muss. Führen Sie die Nadel senkrecht zur Haut über dem Quadrizeps oder der seitlichen Oberschenkelmuskulatur des Tieres ein.
Achten Sie darauf, nicht in die hintere Muskelmasse zu injizieren, da dies den Ischiasnerv schädigen kann. Die intraperitoneale Verabreichung wird gewählt, wenn ein großes Volumen der Verbindung verabreicht werden soll und dies für die Absorptionsrate akzeptabel ist. Annäherung an die der oralen Verabreichung.
Um eine intraperitoneale Injektion durchzuführen, halten Sie das Tier fest und richten Sie die Nasenspitze auf den Boden. Um den Bauch freizulegen, lokalisieren Sie die Mittellinie des Tieres und mental. Unterteile den Bauch in Quadranten.
Wählen Sie eine Injektionsstelle in den unteren Quadranten, insbesondere in der des Tieres. Verwenden Sie im unteren rechten Quadranten eine Spritze und eine Nadel in geeigneter Größe, um das Material in das Tier zu injizieren. Die subkutane Verabreichung einer Substanz wird verwendet, wenn eine langsame Resorption gewünscht wird.
Mäuse und Ratten haben große Mengen an loser Haut, so dass relativ größere Volumina im Vergleich zum Menschen subkutan sein können. Bei subkutanen Injektionen halten Sie das Tier locker fest, wie zuvor gezeigt. Fassen Sie die Haut und ziehen Sie sie sanft nach oben.
Stellen Sie ein Zelt mit einer Spritze und Nadel in geeigneter Größe her, führen Sie die Nadel in einem Winkel von 30 bis 45 Grad in die Zelthaut ein und injizieren Sie das Material. Eine kleine Schwellung unter der Haut ist das Zeichen einer gelungenen Injektion. Wenn Tiere routinemäßig nach subkutaner Injektion behandelt werden sollen, verwenden Sie den Genick nicht.
Verwenden Sie stattdessen die Haut auf dem dorsalen Bürzel. Wenn Tiere mehrere subkutane Injektionen erhalten sollen, kann es schwierig sein, während der intradermalen Verabreichung alternative Injektionsstellen für Tiere zu fixieren, und erfordert die Anwendung einer chemischen Sedierung. Wenn ein Anästhetikum verwendet wird, stellen Sie sicher, dass es keine Forschungsziele beeinträchtigt.
Wenn Sie eine intradermale Injektion durchführen, entfernen Sie zunächst Haare von der Injektionsstelle, so dass die Haut an der Injektionsstelle deutlich sichtbar ist. Führen Sie eine Nadel in geeigneter Größe in einem Winkel von 15 bis 30 Grad in die Haut ein. Führen Sie die Nadel nicht zu weit ein.
Bei korrekter Anwendung sollte die Injektion auf Widerstand stoßen. Ein kleiner Bläschen, der blass als die umgebende Haut ist, wird sichtbar sein, wenn die Injektion erfolgreich war. Üben Sie sanften Druck aus, um einen Rückfluss des Materials zu verhindern.
Die intravaskuläre Verabreichung wird für eine Vielzahl von Verbindungen verwendet und ist die beste Wurzel, wenn die Verbindung entsprechend formuliert werden kann und eine sehr schnelle Wirkung gewünscht ist. Für eine intravaskuläre Injektion in die seitliche Schwanzvene halten Sie das Tier in einem Decap-Kegel oder einem plastischen Nagetier-Fixierer fest. Wie bereits gezeigt, halten Sie den Schwanz des Tieres mit der nicht dominanten Hand an der Spitze, um ihn aufzurichten und zu drehen. Eine Vierteldrehung, um die Schwanzvenen dorsal zu platzieren.
Identifizieren Sie eine der beiden seitlichen Schwanzvenen für die Injektion, wobei Sie die ventrale Schwanzarterie meiden. Nähern Sie sich mit der Nadel in einem Winkel von 15 bis 20 Grad dem distalen Teil des Schwanzes und injizieren Sie das Material. Eine erfolgreiche Injektion führt dazu, dass das Material ohne Widerstand in die Vene eindringt und die Schwanzvene für die Dauer der Injektion blanchiert.
Wenn die Injektion weiter distal platziert wird, bleibt ein unbeschädigter Teil der Vene erhalten, der verwendet werden kann, wenn der erste Versuch nicht erfolgreich ist. Die intragastrische Verabreichung oder orale Sonde wird nur bei fixierten, wachen Tieren durchgeführt, da eine Anästhesie oder Sedierung das Risiko erhöht, dass Aspirationspräparate, die auf ihre Sicherheit getestet werden, für die orale Verabreichung beim Menschen häufig auf diese Weise verabreicht werden. Beginnen Sie mit der Auswahl einer Nadel für die orale Ernährung in geeigneter Größe.
Die Länge wird bestimmt, indem man das zurückgehaltene Tier hochhält und aus dem Mundwinkel misst. Die Kugelspitze der Fütterungsnadel sollte bis zu der des Tieres reichen. Letzte Rippe, halten Sie das Tier so fest, dass sich Kopf und Körper in einer geraden vertikalen Linie befinden.
Dadurch wird die Speiseröhre begradigt und die Fütterungsnadel leichter passieren können. Führen Sie die Kugelspitze der Nadel über der Zunge in das Maul des Tieres ein. Sobald die Nadel an Ort und Stelle ist, bringen Sie die Nadel und die Spritze nach oben und drücken Sie sanft gegen den Gaumen, so dass die Nase des Tieres zur Decke zeigt.
Die Nadel muss möglicherweise leicht umgelenkt werden, wenn sie den Rachen passiert. Jede Spannung auf der Nadel zeigt an, dass die Position angepasst werden muss, um die Nadel weiter zu passieren, bis der vorgegebene Abstand erreicht ist. Die Nadel sollte leicht passieren und das Tier sollte bei der Verabreichung der Substanz nicht nach Luft schnappen oder ersticken.
Wenn es Widerstand gibt oder das Tier nach Luft schnappt, würgt oder blau wird, stoppen Sie sofort und entfernen Sie die Nadel. Sobald Sie diese Techniken beherrschen, können Sie sowohl Ratten als auch Mäusen sicher Dosen verabreichen und sie effektiv zurückhalten. Wenn Sie diese Verfahren ausprobieren, ist es wichtig, daran zu denken, dass ein korrekt gesichertes Tier das Verfahren sowohl für das Tier als auch für den Hundeführer sicher macht.
Vergessen Sie nicht, dass die Arbeit mit Tieren in der Wissenschaft ein Privileg und eine Verantwortung ist. Die Wahl der richtigen Fixierungsmethode und der geeigneten Verabreichungswege ist sowohl eine gute Wissenschaft als auch ein gutes Wohlergehen.
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