Blinddarm Ligation Punktion

Hallo, mein Name ist Miguel Toscano aus dem Labor von Dr. Dena in der Abteilung für Mikrobiologie und Hemologie an der Temple University. Heute zeigen wir Ihnen, wie Sie das iCal-Allegations- und Punktionsmodell in der Sorte C 57 Black Seas Mouse einrichten. Wir verwenden dieses Modell in unserem Labor, um die menschliche Sepsis nachzuahmen.

Grundsätzlich handelt es sich bei diesem Modell um eine Punktion des Seums, die die Freisetzung von Stuhlmaterial in die Bauchhöhle ermöglicht, um eine polymikrobielle Sepsis zu erzeugen und so eine verschlimmerte Immunantwort zu erzeugen. In diesem Modell werden viele Organe und verschiedene Zelltypen irreversibel geschädigt. Das kann am Ende zum Tod des Tieres führen.

Also lasst uns loslegen. Betäubung der Maus. Der erste Schritt ist die Betäubung des Tieres durch intraperitoneale Injektion.

Eine Mischung, eins zu eins aus Ketomine und Xylazin. Um nicht von der Maus gebissen zu werden, um sie nicht zu verletzen, müssen wir die Maus mit einer Hand vom Schwanz packen. Mit der anderen Hand drücken wir uns mit dem Rücken gegen den Boden.

Dann können wir die Maus vom Hinterkopf greifen und dann das Tier auf den Rücken drehen, um den Bauch freizulegen. Mit einer Insulinspritze von 29 gauge injizieren wir 20 bis 30 Mikroliter der Anästhesie in die Bauchhöhle. Bereiten Sie die Maus für den Eingriff vor, greifen Sie den Rücken der Maus und rasieren Sie ihren Bauch, indem Sie auf den Schwanz und/oder das Bein der Maus drücken.

Wir prüfen, ob die Maus nicht schmerzempfindlich ist, dann wird der Bauch desinfiziert. Zuerst durch Schrubben mit Betadine-Lösung, gefolgt von Abwischen mit einem Isopropylalkohol-Tuch für mindestens eine Minute. Üben der Laparotomie Um eine Laparotomie durchzuführen, heben wir die Haut in der Mitte des Bauches mit der Pinzette an und machen einen kleinen Schnitt von etwa einem Zentimeter Länge.

Heben Sie dann den Damm an und üben Sie einen weiteren kleinen Schnitt, um die Bauchhöhle freizulegen. Halten Sie die Peritonealmembran mit einer gebogenen Pinzette fest. Identifizieren und legen Sie den Blinddarm frei, indem Sie ihn durch die Peritonealmembran führen.

Lege es über den Bauch. Jetzt ist der Moment der Ligatur. Dies ist ein wichtiger Faktor.

Um den Schweregrad des Modells zu bestimmen, können wir den Schweregrad des Eingriffs modulieren. Durch die Verlängerung der Ligatur entwickeln die Mäuse eine mildere Sepsis. Wenn die Ligatur näher am Ende des Blinddarms durchgeführt wird, eine mittelgradige Sepsis in der Mitte und eine schwere Sepsis, wenn sie näher an der Ileozökalklappe durchgeführt wird, spiegelt sich die Schwere des Eingriffs durch den Prozentsatz der Mortalität wider.

Ligateln Sie niemals die Ileozökalklappe. Machen Sie nun die Ligatur mit einer Seidennaht mit einem Doppelknoten, um sie fest zu machen, und machen Sie die Punktion. Halten Sie den Blinddarm fest und machen Sie vorsichtig eine Punktion in der Nähe der Ligaturstelle und machen Sie eine weitere Punktion näher am Ende des Blindhalses. Die Membran des Secums ist weich und lässt sich sehr leicht perforieren.

Mit unterschiedlich dicken Nadeln und ein oder zwei Perforationen können wir auch den Schweregrad des Modells modulieren. Die hier gezeigte Einfach- oder Doppelpunktionsmethode ist eine alternative Technik zur klassischen Durch- und Durchpunktion. Der Vorteil der einfachen oder doppelten Punktionsmethode besteht darin, dass man die Menge des extrudierten Kots besser kontrollieren kann, wenn man ihn zusammendrückt

Halten Sie das Secum mit beiden Fingern fest und extrudieren Sie den Blinddarm vorsichtig, um eine sehr kleine Menge Kot zu extrahieren. Schließen Sie die Laparotomie, heben Sie dann das Peritoneum an und setzen Sie den Blinddarm vorsichtig zurück. In der Bauchhöhle.

Seien Sie äußerst vorsichtig, um versehentliche Stiche in den Blinddarm zu vermeiden. Bei der Pinzette wird die Verwendung einer größeren Zange empfohlen. Jetzt ist es an der Zeit, die Bauchhöhle zu schließen. Bei der Verwendung von Seidennaht ist es sehr wichtig, dass Sie sicherstellen, dass sie sehr gut verschlossen ist.

Wir beginnen an einer Seite der Wunde, wo wir einen Knoten machen. Machen Sie die Naht bis zur anderen Seite, indem Sie die Seide unter die Schlaufe der vorherigen Punktion führen. Um die Haut zu schließen, können wir mit dem richtigen Werkzeug zum Schließen der Clips Mitchell-Wundclips oder Reflexclips verwenden.

Platzieren Sie so viele Clips wie nötig, um sicherzustellen, dass die Wunde geschlossen ist. Reanimieren Sie Mäuse, indem Sie subkutan einen Milliliter vorwarme Kochsalzlösung injizieren. Mit einer 25-Gauge-Nadel wird bei dieser Flüssigkeitswiederbelebungsmaßnahme die hyperdynamische Phase der Sepsis eingeleitet und der Eingriff abgeschlossen.

Legen Sie die Maus unter eine Infrarot-Heizleuchte oder alternativ auf ein Heizkissen, bis sich die Maus von der Narkose erholt hat. Stellen Sie Futter und Wasser auf dem Boden des Käfigs bereit und beaufsichtigen Sie die Tiere alle acht bis 12 Stunden auf Anzeichen von Krankheiten. Injizieren Sie Buprenorphin subkutan zur postoperativen Analgesie.

Ein anderes Analgetikum, das verwendet werden kann, ist T.Tramadol. Anzeichen einer Sepsis, Symptome einer Sepsis sind Fieber, Lethargie, Pelo, Erektion, Durchfall, Kuscheln und Unwohlsein. Sehr kranke Tiere zeigen einen starken Abfall der Körpertemperatur und bewegen sich kaum, um Leiden zu vermeiden.

Sie sollten in diesem Stadium eingeschläfert werden H.So so führen wir die Sichelligatur und das punktuelle Modell durch. Hoffentlich hat Ihnen die Demonstration dieses Verfahrens gefallen und Sie fanden es sehr nützlich für Ihre Forschung, bevor Sie mit Ihrer Tierstudie beginnen. Wir empfehlen Ihnen dringend, alte oder ungenutzte Köpfe für das Training zu verwenden, um den angemessenen Schweregrad für Ihre Experimente zu bestimmen, indem Sie die Länge der Ligatur, die Dicke der Nadel und die Anzahl der Einstiche ändern.

In diesem Sinne, auf Wiedersehen.