Systemische Pilocarpin-Behandlung: Mausmodell der Temporallappenepilepsie

0 Aufrufe3:50 Min. • April 30th, 2023

Verabreichen Sie zu Beginn eine Injektion von Scopolamin und Terbutalinlösung, um die peripheren Nebenwirkungen von Pilocarpin zu minimieren. Als nächstes verabreichen Sie eine Injektion von Pilocarpin-Lösung, um den Status epilepticus oder SE zu induzieren. Pilocarpin verändert die neuronale Erregbarkeit des Gehirns.

Unmittelbar danach legen Sie die Maus in einen warmen Inkubator und überwachen Sie die Induktion von SE. Achten Sie auf Kopfnicken und rhythmische Bewegungen der Vorderbeine oder auf ein Verhalten der Stufe 3 oder höher auf der Racine-Skala. Platzieren Sie dann die Maus in einem Inkubator bei Raumtemperatur und überwachen Sie weiterhin das Verhalten des Tieres.

Als nächstes verabreichen Sie eine Injektion von Diazepam-Lösung, um SE zu beenden. Verabreichen Sie schließlich eine Injektion von Dextroselösung, um die Genesung des Tieres zu unterstützen. Nach der SE-Induktion tritt das Tier in eine anfallsfreie Latenzzeit ein, bis spontane wiederkehrende Anfälle auftreten.

Beginnen Sie damit, jede 8 Wochen alte männliche Maus zu wiegen. Stellen Sie 2 Milligramm pro Kilogramm Scopolamin und Terbutalin sowie 280 Milligramm pro Kilogramm Pilocarpin-Lösung her. Injizieren Sie dann die Lösung intraperitoneal in jede Maus und bringen Sie die Mäuse in ihre Käfige zurück.

30 Minuten nach der Verabreichung von Scopolamin und Terbutalin injizieren Sie Pilocarpin-Lösung in jede Maus. Unmittelbar nach der Pilocarpin-Injektion legen Sie die Mäuse zur Beobachtung in einen Inkubator mit 28 bis 30 Grad Celsius. Überwachen Sie als Nächstes das Verhalten der Mäuse, bis der Status epilepticus oder SE induziert wird. Wenn limbische motorische Anfälle festgestellt werden, die gemäß der Racine-Skala dem Stadium 3 oder höher entsprechen, zeichnen Sie die Zeit auf und überwachen Sie die Mäuse.

Sobald kontinuierliche motorische Anfälle länger als 2 Minuten andauern, setzen Sie die Maus in einen neuen Käfig bei Raumtemperatur und überwachen Sie sie 3 Stunden lang, um festzustellen, ob ihre Krampfanfälle anhalten und SE induziert wird. Beenden Sie dann verhaltensbedingte akute Anfälle 3 Stunden nach SE-Beginn, indem Sie 10 Milligramm pro Kilogramm Diazepam-Lösung injizieren. Verabreichen Sie nach der Diazepam-Injektion 1 Milliliter 5% Dextrose pro Maus, um die Genesung zu unterstützen.

Wiegen Sie die Mäuse an Tag 1 nach der SE-Induktion und bewahren Sie sie einen weiteren Tag im Inkubator auf. Wiegen Sie die Mäuse an Tag 2 nach der SE-Induktion und bringen Sie sie in ihren Heimkäfig zurück. Stellen Sie feuchtes Futter bereit, um die Regeneration zu erleichtern. Messen Sie schließlich das tägliche Körpergewicht der Tiere bis 7 Tage nach der Behandlung mit Pilocarpin, und wenn das Körpergewicht nicht zugenommen hat, injizieren Sie den Mäusen 5% Dextrose.