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Krebsforschung
0 Aufrufe • 5:09 Min. • April 30th, 2023
Mitochondrien, die zytoplasmatischen Organellen, die als Kraftwerke der Zelle bekannt sind, erfahren während des Fortschreitens der Krebserkrankung drastische strukturelle und funktionelle Veränderungen.
Um Mitochondrien zu isolieren, nehmen Sie sauberes Krebsgewebe in eine Glasschale und hacken Sie es in kleine Stücke. Übertragen Sie die Stücke in ein Röhrchen mit mitochondrialem Isolationspuffer. Homogenisieren Sie die Probe, um die Zellen aufzubrechen und ihren Inhalt, einschließlich der Organellen, freizusetzen.
Zentrifugieren Sie die Mischung bei niedriger Geschwindigkeit. Dadurch werden die dichteren Komponenten wie Zellkerne, Gewebetrümmer und intakte Zellen pelletiert, sodass weniger dichte Komponenten wie Mitochondrien, Mikrosomen, Peroxisomen und Lysosomen im Überstand übrig bleiben. Den Überstand auffangen und bei hoher Geschwindigkeit zentrifugieren. Mikrosomen, die relativ leichter sind, verbleiben im Überstand, während die rohe mitochondrienhaltige Fraktion am Boden pelletiert.
Entfernen Sie den Überstand und resuspendieren Sie das Pellet in einem geeigneten Medium mit Dichtegradienten. Richten Sie einen diskontinuierlichen Dichtegradienten ein, indem Sie die rohe mit
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