JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:13 Min. • April 30th, 2023
Tumorigene Zellen aus dem Eileiter regen gesunde Eierstockzellen dazu an, chemische Kommunikatoren oder kleine Moleküle zu produzieren, die die Tumormetastasierung fördern. Um diese chemischen Kommunikatoren zu visualisieren, beginnen Sie damit, einen Well-Divider auf einem geeigneten Objektträger zu montieren. Positionieren Sie eine Kunststofftrennwand diagonal in der Vertiefung, um die Vertiefung in zwei gleich große Fächer zu unterteilen. Geben Sie eine Suspension von Eileitertumorzellen in flüssiger Agarose in ein Kompartiment der Vertiefung ab. Beim Abkühlen verfestigt sich die Agarose und bildet ein 3D-Netzwerk, das den Einschluss von Tumorzellen ermöglicht.
Entfernen Sie die Trennwand und legen Sie ein gesundes Eierstockgewebe mittig in das leere Fach. Bedecken Sie es mit einer flüssigen Agarosemischung. Lassen Sie die Agarose sich verfestigen und betten Sie das Eierstockgewebe in der Nähe der Krebszellen ein. Inkubieren Sie für die gewünschte Dauer. Sowohl die Tumorzellen als auch gesunde Eierstockzellen produzieren kleine Moleküle, die durch das Agarose-Netzwerk zu ihren Nachbarzellen diffundieren.
Entfernen Sie den Grubenteiler. Trocknen Sie die Co-Kultur, um den Agar zu
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