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Das Fettgewebe oder die Fettdepots, die hauptsächlich in den omentalen, mesenterialen, uterinen, gonadalen und splenoportalen Regionen des Peritoneums vorhanden sind, können eine geeignete Mikroumgebung für die Besiedlung von Krebszellen während der Metastasierung darstellen.
Um diese Bauchfelldepots zu isolieren, beginnen Sie mit der Entnahme einer euthanasierten weiblichen Maus. Machen Sie einen chirurgischen Schnitt in der Mittellinie durch die Peritonealwand, um die inneren Organe freizulegen. Lokalisieren Sie nun das über dem Magen- und Pankreasmilzkomplex vorhandene Omentalfett und extrahieren Sie es. Exzidieren Sie das Gonadenfett, das die Eierstöcke umgibt. Entfernen Sie außerdem das Gebärmutterfett, das die Gebärmutterhörner umhüllt. Schneiden Sie anschließend die Verbindung zwischen Dünndarm und Pylorus ab, um das am Darm befestigte Mesenterialfett freizusetzen. Extrahieren Sie schließlich das dünne Band aus Milzportalfett, das das distale Ende der Milz mit der Bauchspeicheldrüse verbindet.
Bewahren Sie das präparierte Fettgewebe in einem geeigneten gekühlten Puffer auf, um die Gewebephysiologie zu erhalten. Analysieren Sie dieses Peritonealfettgewebe, um das Vorhandensein von kolonisierten metastasierenden Krebszellen zu beurteilen.
Da die Entnahme von Bauchfelldepots eine Entnahme innerer Organe darstellt, machen Sie einen Mittellinienschnitt in der Nähe der Leistenpapillen durch die Peritonealwand, um die inneren Organe freizulegen. Um das omentale Fett zu entfernen, legen Sie den omentalen Pankreaskomplex frei, indem Sie die Milz mit einer Pinzette aus der Bauchhöhle verlängern.
Verwenden Sie für das Gonadenfett eine Pinzette, um das Gonadenfett, das die Eierstöcke umgibt, anzuheben, und entfernen Sie es, indem Sie die Gewebeverbindungen durchtrennen. Legen Sie die Taschentücher sofort in eiskaltes PBS. Entfernen Sie als Nächstes das Gebärmutterfett, indem Sie mit einer Zange das Gebärmutterfett um die Gebärmutterhörner herum anheben und die Gewebeverbindungen durchtrennen, bevor Sie das Gewebe sofort in eiskaltes PBS legen.
Bei der Gewinnung des Mesenterialfetts wird die Verbindung zwischen dem Dünndarm und dem Pylorus durchtrennt. Fassen Sie das freie Ende des Dünndarms mit einer Pinzette fest und schälen Sie es langsam vom Mesenterialfett ab. Lösen Sie das Mesenterialfett mit einer Präparierschere aus der Mesenterialwurzel. Legen Sie dann die Taschentücher sofort in eiskaltes PBS.
Um schließlich das Milzfett zu entfernen, heben Sie das distale Ende der Milz mit einer Pinzette an, um das dünne Fettband des Gewebes freizulegen, das den Hilum der Milz mit der Bauchspeicheldrüse verbindet. Entfernen Sie das Milzportalfett, indem Sie es zuerst aus der Bauchspeicheldrüse lösen und dann vorsichtig von der Milz trennen. Legen Sie dann sofort die Taschentücher in PBS.
