FFPE-Tumorgewebe-Makrodissektion: Eine Technik zur Gewinnung von spezifischem Tumorgewebe aus ungefärbten Proben

Um mit der Makrodissektion zu beginnen, nehmen Sie einen Objektträger mit einer Gewebeprobe. Nehmen Sie zusätzlich einen Referenzobjektträger mit derselben Gewebeprobe und färben Sie ihn mit Hämatoxylin und Eosin für die H&E-Färbung.

In normalen Zellen verleiht Hämatoxylin den Nukleinsäuren eine blaue Färbung, während die Eosin-Gegenfärbung die zellulären Proteine rosa zeigt. Die tiefblaue Färbung des Zellkerns hilft bei der Unterscheidung von Krebszellen von normalen Zellen.

Überlagern Sie den H&E-gefärbten Objektträger mit dem ungefärbten Objektträger, um die Gewebeproben auszurichten. Lokalisieren Sie den Teil, der Tumorzellen auf dem H&E-gefärbten Objektträger enthält. Markieren Sie die entsprechende Stelle auf dem fleckenfreien Objektträger.

Kratzen Sie das gewünschte Gewebe von dem ungefärbten Objektträger ab. Sammeln Sie mit einer feuchten Pipettenspitze das abgeschabte Gewebe, um einen einfachen Transfer der Gewebeprobe zu gewährleisten. Übertragen Sie das Gewebe in ein Röhrchen, das einen Lysepuffer enthält. Bestandteile des Lysepuffers verdauen das Gewebe und setzen die Bestandteile der Zelle frei.

Behandeln Sie das Lysat mit einer geeigneten Protease und inkubieren Sie e