Chorioallantoische Membran des Kükens oder CAM-Tumormodell: Eine In-Ovo-Methode zur Simulation der perineuralen Invasion von Tumorzellen

Bei bestimmten metastasierenden Krebsarten dehnen sich Tumorzellen vom Ursprungsort weg und dringen in das Nervengewebe ein, ein Phänomen, das als perineurale Invasion oder PNI bezeichnet wird.

PNI kann in ovo auf der Oberfläche der chorioallantoischen Membran oder CAM nachgewiesen werden, die die Basalmembran des menschlichen Epithelgewebes nachahmt.

Nehmen Sie zunächst ein lebensfähiges, befruchtetes Hühnerei mit teilweise geöffneter Schale, wodurch ein voll entwickeltes CAM freigelegt wird.

Isolieren Sie als Nächstes die Spinalganglien oder DRG aus dem Rückenmark einer Maus. DRG ist eine Ansammlung von sensorischen Neuronen, mit denen die Krebszellen in den perineuralen Raum eindringen.

Inkubieren Sie die DRG in einem geeigneten Medium mit einem Fluoreszenzfarbstoff, um sie für eine einfache Visualisierung zu markieren. Übertragen Sie nun das DRG auf die CAM-Oberfläche, ohne die Membran zu zerreißen.

Decken Sie das Ei mit einer transparenten Folie ab, um eine mikrobielle Kontamination zu vermeiden. Inkubieren Sie danach das Ei, um die DRG-Integration in CAM zu erleichtern.

Nach der Inkubation säen Sie die fluoreszenzmarkierten Krebszellen auf einer trockenen Oberfläche aus CAM,