Herstellung einer extrazellulären Matrix aus einem Mausmodell: Ein effektives Verfahren zur Herstellung einer dezellularisierten extrazellulären Zungenmatrix aus der Mauszunge

Die extrazelluläre Matrix oder EZM – die nicht-zelluläre Komponente des Gewebemilieus – besteht aus einem komplexen Netzwerk von strukturellen und regulatorischen Proteinen und Polysacchariden, die von Zellen sezerniert werden. Die EZM bietet den Zellen strukturelle und biochemische Unterstützung und reguliert ihr Wachstum.

Um die extrazelluläre Matrix der Zunge vorzubereiten, beginnen Sie mit der Entnahme einer frisch geernteten Mauszunge. Waschen Sie es mit Ethanol, um seine Lipidschicht zu entfernen.

Setzen Sie es dann abwechselnden Gefrier- und Auftauzyklen aus. Das Einfrieren fördert die intrazelluläre Bildung von Eiskristallen, während das Auftauen die Eiskristalle schmilzt, was zu einer Störung der Zellmembran führt.

Hängen Sie nun die Zunge in eine Antibiotikalösung, um das Bakterienwachstum zu hemmen. Behandeln Sie das Organ anschließend mit einer hypertonen Kochsalzlösung. In Gegenwart einer hohen Konzentration an gelösten Stoffen fließt Wasser aus den Zellen heraus, wodurch sie schrumpfen. Dieser Schritt hilft beim Zelltod und bei der Loslösung von der extrazellulären Matrix.

Inkubieren Sie die Zunge in einem nichtionischen Tensid. Das Tensid löst die Zell- und Kernmembr