JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 2:22 Min. • April 30th, 2023
Kryogenes Mahlen oder Kryomahlen ist eine Technik, die es ermöglicht, dezellularisierte Gewebeproben auf extrem niedrige Temperaturen abzukühlen und zu einem feinen Pulver zu mahlen, während ihre biochemische Zusammensetzung erhalten bleibt.
Zu Beginn erhalten Sie eine lyophilisierte, aus Gewebe gewonnene dezellularisierte extrazelluläre Matrix oder EZM von Interesse. Zerkleinern Sie es, um kleine Fragmente zu erhalten.
Anschließend werden die zerkleinerten ECM-Fragmente in einen Mahlbehälter überführt. Geben Sie die Mahlkugeln in den Mahlbehälter. Tauchen Sie das beladene Mahlglas in flüssigen Stickstoff, um die Probe bei -196 °C einzufrieren.
Laden Sie das abgekühlte Glas in ein Kryomahlsystem. Setzen Sie die gefrorene Probe für die gewünschte Dauer einer Kryomahlung mit einer angemessenen Häufigkeit aus.
Beim Kryomahlen oszilliert der Mahlbecher radial in der horizontalen Position. Die Trägheit der Mahlkugeln ermöglicht es ihnen, die gefrorene Probe mit hoher Energie an den abgerundeten Enden des Gefäßes zu beeinflussen und zu pulverisieren.
Darüber hinaus fördert die Bewegung des Mahlbechers in Verbindung mit der Bewegung der Mahlkugeln ein intensives Mischen der Probe, um ein
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