Modellierung der krebsartigen neuronalen Invasion in vitro: Eine Methode zur Co-Kultur von Spinalganglien und Krebszellen

Die neuronale Invasion ist der Mechanismus der Krebsmetastasierung, bei dem neurotrophe Krebszellen eine intrinsische Fähigkeit zeigen, in und um Nerven herum zu wachsen. Um dieses Phänomen in vitro zu beobachten, nehmen Sie zunächst ein isoliertes murines Spinalganglion oder DRG - eine Ansammlung von Zellkörpern sensorischer Neuronen.

Stellen Sie das DRG in ein eiskaltes Medium, um seine Lebensfähigkeit zu erhalten. Übertragen Sie nun das DRG in einen Tropfen gekühlter extrazellulärer Matrix oder ECM, der als dreidimensionales Gerüst um das DRG dient. Als nächstes säen Sie die neurotrophen Krebszellen in angemessenem Abstand um die DRG in die EZM ein.

Lassen Sie die EZM sich verfestigen, um das DRG und die Krebszellen darin einzubetten. Zum Schluss fügen Sie der ECM ein geeignetes Wachstumsmedium hinzu und inkubieren. Die nutritiven Wachstumsmedien und die ECM-Proteine bieten ein optimales Mikromilieu für die Explantate.

Während der Inkubation bewirkt die wechselseitige Wechselwirkung zwischen den Explantaten, dass DRG kleine Nervenvorsprünge oder Neuriten sprießen lässt, die radial zu den Krebszellen herauswachsen. Gleichzeitig wandern Krebszellen unidirektional von ihren Kolonie