Methylthiazolyltetrazolium oder MTT-Assay: ein kolorimetrischer Assay zur Messung der Arzneimittelresistenz durch Bestimmung der Stoffwechselaktivität in Krebszellen

Der Methylthiazol-, Tetrazolium- oder MTT-Assay ermöglicht die Beurteilung der Zellviabilität auf der Grundlage der Messung der zellulären Stoffwechselaktivität.

Bereiten Sie zu Beginn des Assays eine Reihe von steigenden Konzentrationen des interessierenden Arzneimittels vor. Geben Sie gleiche Volumina der verschiedenen Wirkstoffkonzentrationen in die Vertiefungen einer Multi-Well-Platte.

Als nächstes pipettieren wir eine Suspension der gewünschten arzneimittelempfindlichen elterlichen Krebszellen und ihrer arzneimittelresistenten Varianten in einem geeigneten Medium, jeweils in einen Satz von Vertiefungen, die unterschiedliche Wirkstoffkonzentrationen enthalten. Inkubieren Sie die Platte.

In Kultur reagieren die medikamentenempfindlichen Krebszellen empfindlich auf die Wirkstoffmoleküle, was bereits bei geringen Konzentrationen zum Zelltod führt. Im Gegenteil, die arzneimittelresistenten Krebszellen sind unempfindlich gegenüber den Wirkstoffmolekülen, was ihr Überleben und ihre Vermehrung auch bei höheren Wirkstoffkonzentrationen erleichtert.

Behandeln Sie die Zellen mit MTT-Lösung und inkubieren Sie. MTT, ein positiv geladenes Tetrazoliumsalz, dringt leicht in die stoffwechselak