Blasentumor-Organoidmodell: Eine Methode zur orthotopen Transplantation von Blasenorganoiden in die Empfänger-Mausblase

Patienten-Tumor-Organoide sind Miniaturtumoren, die sich aus dem Elternorgan entwickelt haben. Bei der Transplantation in ein Tiermodell behalten diese Organoide die meisten phänotypischen und genetischen Eigenschaften des ursprünglichen Tumors bei, was eine personalisierte Krebstherapie ermöglicht. Zum Beispiel färben sich Blasenkrebs-Organoide für viele zelluläre Marker positiv wie ihr entsprechender elterlicher Tumor.

Um ein Tumor-Organoid-Modell zu entwickeln, beginnen Sie mit einer Kultur von Blasentumor-Organoiden. Kollagenase-Enzymsuspension in die Organoidkultur geben und inkubieren. Kollagenase baut die Matrixbestandteile auf. Fügen Sie nun ein vorgewärmtes Nährmedium hinzu, um die freien Organoide in Suspension freizusetzen. Zentrifugieren Sie bei niedriger Temperatur, um die verbleibende Kollagenaseaktivität zu neutralisieren und das Organoid-Pellet zu erhalten.

Der Überstand, der neutralisierte Enzyme und abgebaute Matrixkomponenten enthält, wird verworfen und das Pellet in frischen Medien wieder suspendiert. Übertragen Sie die Organoid-Suspension in ein Wachstumsmedium, das die Basalmembranmatrix enthält. Ziehen Sie anschließend das Organoid und die Mediensuspension in