Ableitung humaner Nierenpodozyten aus induzierten pluripotenten Stammzellen: Ein Verfahren zur gerichteten Differenzierung reifer Nierenpodozyten aus Stammzellen

Reife Zellen können so umprogrammiert werden, dass sie wieder in ihren stammzellähnlichen, undifferenzierten und proliferativen Zustand gelangen. Diese reprogrammierten Zellen werden als induzierte pluripotente Stammzellen oder IPSCs bezeichnet. Um pluripotente Zellen in Podozyten-spezialisierte Zellen zu differenzieren, die an der Filtration von Nierenabfällen beteiligt sind, beginnen Sie mit der Einnahme einer Suspension von humanen IPSCs in einem Mesoderm-Induktionsmedium.

Übertragen Sie diese Suspension auf eine mit Kellermatrix beschichtete Kulturplatte und inkubieren Sie. Die Kellermatrix erleichtert die Verklebung von IPSCs an der Basis. Anschließend induzieren die spezifischen Faktoren, die in den Medien vorhanden sind, die Differenzierung von IPSCs in die Mesodermzellen, die Vorläuferzellen für Podozyten. Aspirieren Sie das verbrauchte Medium.

Ergänzen Sie die Platte mit dem gewünschten Volumen eines intermediären Mesoderm-Induktionsmediums und inkubieren Sie für eine längere Zeit. Dieser Schritt führt zur Differenzierung der mesodermalen Zellen in unreife Podozyten. Ersetzen Sie das intermediäre Mesoderm-Induktionsmedium durch eine Trypsinlösung, um die adhärenten Zellen