Glomeruli-Isolierung: Eine Technik zur Gewinnung intakter Glomeruli aus der Murine

In den Nieren von Wirbeltieren bestehen die Nephrone aus mehreren Glomeruli - einem dichten Netzwerk von Blutgefäßen -, die eine Hauptrolle bei der Filterung von Abfallstoffen aus dem Körper spielen.

Um Glomeruli zu isolieren, beginnen Sie mit der Entnahme einer frisch präparierten Mausniere. Lösen Sie mit einer Pinzette die Nierenkapsel von der Niere ab und legen Sie die saubere Niere in eine neue Kulturschale. Stellen Sie nun die Schale auf Eis, um eine Nierendegradation zu vermeiden. Die Niere in kleine Stücke hacken.

Anschließend werden die zerkleinerten Nierenstücke in einer geeigneten Pufferlösung wieder suspendiert. Filtrieren Sie die Gewebesuspension durch einen großformatigen Netzfilter und sammeln Sie den Durchfluss in einer frischen Schale. Wiederholen Sie diesen Schritt noch einige Male, während Sie die Maschenöffnung jedes Mal schrittweise verringern, bis sich die Glomeruli von den Nierenfragmenten dissoziieren.

Waschen Sie abschließend den Filter mit dem gewünschten Nährmedium, um die kleineren eingeschlossenen Glomeruli aufzufangen, während die Nierenfragmente im Filtrat verbleiben. Übertragen Sie die Glomeruli auf eine extrem niedrige Befestigungsplatte. Visualisier