Intravenöse Mikroinjektion von Nephrotoxinen in den Zebrafischembryo: Eine Technik zur Abgabe nephrotoxischer Wirkstoffe in den Blutkreislauf des Zebrafischembryos

Die intravenöse Mikroinjektion erleichtert die Verabreichung von Molekülen von Interesse in den Blutkreislauf eines Empfängertieres. Um Nephrotoxine in einen Zebrafischembryo zu bringen, bereiten Sie zunächst eine geeignete Konzentration der gewünschten Nephrotoxinlösung vor.

Laden Sie diese Nephrotoxinlösung mit einer feinen Gelladespitze in eine Mikroinjektionsnadel mit einer geschärften Eckspitze. Hängen Sie die Nadel vertikal auf, damit die Nephrotoxinlösung die Nadelspitze durch die Schwerkraft füllen kann. Befestigen Sie nun die geladene Mikroinjektionsnadel in der Halterung eines Mikromanipulators.

Anschließend

wird ein betäubter Zebrafischembryo in die vorgefertigte Mikrospritzgussform überführt. Richten Sie den Embryo in der Form so aus, dass der Kopf innerhalb der Vertiefung und der Schwanz aus der Vertiefung ausgerichtet ist, um die Zugänglichkeit zum Schwanz für die Mikroinjektion zu verbessern. Positionieren Sie dann die Nadelspitze genau in der Nähe des Embryos.

Injizieren Sie die Nephrotoxinlösung in die Schwanzvene des Embryos. Die injizierten nephrotoxischen Wirkstoffe verteilen sich im Kreislauf und erreichen entfernte Organe wie die Niere. Ziehen Sie die Nadel vo