Assay zur Nachahmbarkeit der Blut-Hirn-Schranke: Ein In-vitro-Assay zur Beurteilung der Durchlässigkeit von BHS-Nachahmung gegenüber Tracermolekülen

Die Blut-Hirn-Schranke (BHS), bestehend aus Endothelzellen, Perizyten und Astrozyten, reguliert den Ein- und Ausfluss biologischer Moleküle und trägt zur Aufrechterhaltung der Homöostase des Gehirns bei.

Um die Permeabilität des BHS-Modells in vitro zu beurteilen, beginnen Sie mit einem in vitro BHS-Modell, das aus adhärenten Endothelzellen auf der oberen oder Blutseite des porösen Membraninserts und anhaftenden Astrozyten auf der basalen oder hirnseitigen Seite der Membran besteht.

Die Endothelzellen mit ihrer extrazellulären Matrix kontaktieren die Astrozyten und bilden die BHS-Imitator.

Übertragen Sie das gewünschte Medienvolumen aus dem Blut und der Gehirnseite in eine schwarze Multiwell-Platte, um eine optimale Fluoreszenzmessung zu ermöglichen.

Ersetzen Sie das Medium von der Blutseite der Kultur durch Medien, die fluoreszierende Tracermoleküle mit kleinem Molekulargewicht enthalten.

In Kultur verstärken die Endothel-Astrozyten-Zellkontakte die zelluläre Barriere und stabilisieren die enge Barriere, wodurch die Diffusion von Tracermolekülen auf die Gehirnseite der Kultur begrenzt wird.

Sammeln Sie außerdem geeignete Medienmengen aus dem Blut und der Gehirnseite zu den gewünsc