Isolierung von Gehirnzellen aus Zebrafischlarven: Eine Technik zur Gewinnung intakter Neuronen, Makrophagen und Mikroglia aus Zebrafisch-Hirngewebe

Das Gehirn des Zebrafisches besteht aus Neuronen – Nervenzellen, die eine herausragende Rolle bei der Verarbeitung von Informationen spielen. Darüber hinaus umfasst es eine Population von unterstützenden Immunzellen, einschließlich Makrophagen und Mikroglia, die den interneuronalen Raum bewohnen.

Um all diese Arten von Gehirnzellen aus einem Zebrafisch zu isolieren, nehmen Sie zunächst anästhesierte Zebrafischlarven in eine Petrischale, die geeignete Medien enthält.

Visualisieren Sie den Zebrafisch unter einem Stereomikroskop und durchschneiden Sie die Larvenköpfe über dem Dottersack, um das Gehirn intakt zu halten.

Die herausgeschnittenen Köpfe in einen mit vorgekühltem Medium gefüllten Homogenisator geben und auf Eis legen. Niedrige Temperaturen helfen, den Abbau von Gehirnzellen zu verhindern.

Mit einem Stößel das Gehirngewebe des Zebrafisches homogenisieren. Die Homogenisierung zersetzt die extrazelluläre Matrix und leitet die Dissoziation von Neuronen, Makrophagen und Mikroglia vom Hirngewebe ein.

In diesem Schritt wird auch das Myelin - eine lipidreiche Isolierschicht - von den Neuronen getrennt.

Passieren Sie das Homogenat durch ein Sieb, um große Zellklumpen einzufangen.

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