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Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:07 Min. • July 8th, 2025
Die digitale Tröpfchenpolymerase-Kettenreaktion oder dPCR-Technologie unterteilt Reaktanten einer einzelnen PCR-Reaktion in Millionen von Nanotröpfchen-PCR-Reaktionen. Diese Massenpartitionierung mit anschließender Amplifikation weist eine winzige Menge mutierter DNA vor einem großen Hintergrund von Wildtyp-DNA nach und ermöglicht so eine Früherkennung von Krebs.
Aspirieren Sie zunächst einen dPCR-Mastermix, der fluoreszenzmarkierte Oligonukleotide zusammen mit anderen PCR-Reagenzien und einem tröpfchenstabilisierenden Öl enthält. Geben Sie diesen Mastermix in einem PCR-Streifenröhrchen direkt in den Boden jeder Vertiefung, um Luftblasen zu vermeiden. Geben Sie als Nächstes DNA-Proben in das Reaktionsgemisch und pipettieren Sie mehrmals, um es zu mischen.
Übertragen Sie nun das gesamte Reaktionsgemisch in einen speziellen Chip eines tröpfchenerzeugenden Instruments. Montieren Sie ein frisches PCR-Streifenröhrchen auf das tröpfchenerzeugende Instrument. Der Tröpfchengenerator kombiniert die Probe und das Öl zu diskreten Nanotröpfchen mit einem verkapselten Bereich, der eine Kreuzkontamination zwischen den Tröpfchen verhindert.
Sobald die Tröpletisierung abgeschlossen ist, übertragen
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